جداسازی و شناسایی باکتری های تولیدکننده آسپاراژیناز از پساب فراوری سیب زمینی

-آسپاراژیناز آنزیمی است که اسید آمینه ی آسپاراژین را به آسپارتیک اسید و آمونیاک هیدرولیز می کند. L -آسپاراژیناز دارویی برای درمان لوکمیا و لنفوما به طور اساسی از باکتری هایی مانند Escherichia coli وErwina chrysanthemi تولید می شود و جستجو برای یافتن منابع جدید برای این آنزیم ادامه دارد. در این تحقیق جداسازی باکتری های تولید کننده آنزیم L-آسپاراژینازاز پساب حاصل از فرآوری سیب زمینی انجام شد. پساب حاصل از مرحله شستشو، حاوی تمام ترکیبات محلول در آب سیب زمینی نظیر مقادیر قابل توجهی از اسید آمینه ی آسپاراژین است. جداسازی و غربالگری باکتری ها بر روی محیط های نوترینت آگار و محیط M9 انجام شد. دو جدایه با نام های PW4 وPW5 قابلیت تولید آمونیوم در محیط M9 را دارا بودند. شناسایی مولکولی و آزمایشات بیوشیمیایی نشان داد که این جدایه ها به ترتیب متعلق به جنس Escherichia وEnterococcus هستند. سنجش کمی و کیفی میزان تولید آنزیم این جدایه ها در شرایط مختلف انجام شد. بیشترین میزان تولید را جدایه ی PW4 در صورت رشد در محیط حاوی گلوتامین با میزان IUml-1 10 نشان داد. بیشینه ی میزان تولید آنزیم توسط جدایه ی PW5 نیز در نتیجه تغلیظ مایع رویی حاصل از کشت باکتری در محیط کشت حاوی آسپاراژین به میزان IUml-133/2 مشاهده شد. دو آنزیم بررسی شده فعالیت گلوتامینازی از خود نشان ندادند. نتایج نشان داد، بیشینه ی فعالیت آنزیم تولیدی توسط جدایه ی PW4 در دمای 37 درجه سلسیوس بوده و فعالیت آنزیم در دماهای پایین تر و بالاترکاهش از آن کاهش می یابد. این نتایج خاطرنشان می سازد که این آنزیم قابلیت مطالعات بیشتر جهت استفاده در طراحی دارو را دارا می باشد.