طراحی سازه ژنی ترکیبی جهت تولید نوترکیب باکتریوسین لاتروسپورولین و آنالیز بیوانفورماتیکی پیش ساز پروتئینی با هدف بررسی نقش انتهای آمینی دمین 2SH

باکتریوسین ها پپتیدهای تولید شده توسط باکتری ها می باشند که فعالیت ضدمیکروبی این پپتیدها بر علیه باکتری ها و قارچ ها شناخته شده است. به   منظور تولید مقادیر بالای باکتریوسین با استفاده از فناوری DNA نوترکیب و نیاز به خنثی کردن اثر سمی پپتید و تولید فرم محلول پروتئین می توان از برخی پپتیدها که به عنوان چاپرون ها عمل می کنند، استفاده نمود. لاتروسپورولین یک باکتریوسین 49 اسیدآمینه ای می باشد که به طور طبیعی از باکتری 9-Brevibacillus laterosporus GI ترشح می شود. در مطالعه حاضر، برای اولین بار از انتهای آمینی دمین 2SH به عنوان قطعه پپتیدی کمکی جهت تولید نوترکیب باکتریوسین لاتروسپورولین استفاده شد. در این مطالعه سازه ژنی ترکیبی به صورت پیش ساز پروتئینی حاوی دنباله هیستیدینی، انتهای آمینی دمین 2SH (2N-SH)، جایگاه برش پروتیاز انتروکیناز و در نهایت پپتید لاتروسپورولین طراحی گردید و به کمک آنالیزهای بیوانفورماتیکی اثر دمین 2N-SH بر حلالیت و سطوح آب گریز پروتئین هدف مطالعه شد. نتایج نشان داد دمین 2N-SH با دارا بودن سطوح مناسب آب گریز می تواند به عنوان یک چاپرون مناسب، مانع از مجتمع شدن و به هم ریختگی ساختاری غیرقابل برگشت باکتریوسین لاتروسپورولین گردد. به علاوه آنالیزهای انجام شده نشان داد امکان بیان پروتئین هدف با تاخوردگی مناسب در شرایط آزمایشگاهی وجود دارد. مطالعه حاضر نشان داد دمین 2N-SH می تواند به عنوان یک گزینه مناسب جهت تولید نوترکیب انواع باکتریوسین ها در باکتریاشریشیا کلی عمل نماید.