اثر اسید سیتریک بر توان زیستی و القاء آپوپتوز در رده سلولی آدنوکارسینومای کولورکتال انسان (HT-29)

آدنوکارسینومای کولورکتال به علت پاسخ ضعیف مبتلایان به درمان های رایج، یکی از علل شایع مرگ و میر می باشد. در این مطالعه اثر اسیدسیتریک بر توان زیستی و میزان وقوع آپوپتوز در رده سلولی آدنوکارسینومای کولورکتال انسان (HT-29) بررسی شده است. اسیدسیتریک یک اسید آلی طبیعی است که عموما در عصاره ی مرکبات یافت می شود و به عنوان یک مهارکننده ی فیزیولوژیکی آنزیم های دخیل در مسیر گلیکولیز، در راستای حذف سلول های سرطانی مورد توجه می باشد.

در این مطالعه سلول های سرطانی کولورکتال رده ی HT-29 در محیط کشت DMEM با 10 درصد سرم جنین گاوی کشت داده شدند. سلول ها در غلظت های 400، 800 و 1600 میکروگرم/میلی لیتر اسیدسیتریک تیمار شدند و برای مدت زمان 24، 48 و 72 ساعت انکوبه گردیدند. میزان رشد سلولی با روش رنگ سنجی MTS بررسی شد، میزان القا آپوپتوز به وسیله ی دستگاه فلوسیتومتری با کیت آنکسین-پروپیدیوم یدید (Annexin-PI) طبق دستورالعمل کیت در هر سه زمان انکوباسیون بررسی گردید.

 نتایج بررسی توان زیستی سلول های رده ی HT-29 تیمار شده با غلظت های مختلف اسید سیتریک (400، 800 و 1600 میکروگرم/میلی لیتر)، بعد از گذشت زمان های سه گانه ی انکوباسیون (24، 48 و 72 ساعت) با استفاده از تست MTS حاکی از آن است که توان زیستی سلول های رده ی HT-29 در تمام غلظت های اسیدسیتریک به صورت وابسته به دوز و زمان کاهش می یابد. همچنین نتایج القای آپوپتوز در رده سلولی HT-29 تیمار شده با غلظت های مختلف اسیدسیتریک (400، 800 و 1600 میکروگرم/میلی لیتر)، بعد از گذشت زمان های سه گانه ی انکوباسیون (24، 48 و 72 ساعت) با استفاده از تست Annexin V-FITC، نشان می دهد که درصد سلول هایی که در مرحله ی ابتدایی و انتهایی آپوپتوز هستند با افزایش غلظت اسیدسیتریک و طول زمان انکوباسیون افزایش یافته اند، که این افزایش درصد آپوپتوز نیز نسبت به گروه کنترل در هر سه زمان 24، 48 و 72 ساعت قابل ملاحظه می باشد.

نتایج بیان می کنند که اسیدسیتریک قادر است از طریق القای مسیر آپوپتوزی توان زیستی سلول های آدنوکارسینومای کولورکتال را کاهش دهد.