ارزیابی ایمنی زایی حاملین نانوذرات PLGA حاوی آنتی ژن لیپوپلی ساکارید دتوکسیفیه شده کلبسیلاپنومونیه K2O1 در مدل عفونت ریوی موش BALB/C

کلبسیلاپنومونیه شایع ترین باکتری بیماری زا در جنس کلبسیلاها است. سالیانه مرگ حدود 2 میلیون کودک کمتر از 5 سال از پنومونی گزارش می گردد. هم چنین کلبسیلاپنومونیه عامل ایجاد پنومونی و عفونت های مجاری ادراری، در بیماران با اختلال در سیستم ایمنی و جزء عفونت های بیمارستانی است. به دلیل مقاومت اکتسابی و ذاتی کلبسیلاپنومونیه جداشده در برابر طیف گسترده ای از آنتی بیوتیک ها، به نظر می رسد کنترل و درمان آن حیاتی است. هدف مطالعه حاضر استفاده از نانو ذرات Poly lactic-co-glycolic acid (PLGA) در طراحی واکسن با آنتی ژن دتوکسیفیه شده لیپوپلی ساکارید کلبسیلاپنومونیه K2O1 در مدل عفونت ریوی موش BALB/C است.

در مطالعه حاضر آنتی ژن لیپوپلی ساکارید از سویه کلبسیلاپنومونیه به روش سانتریفیوژ با دور بالا استخراج و توسط فنل داغ سم زدایی گردید. سپس آنتی ژن لیپوپلی ساکارید با نانو ذرات پلی لاکتیک کو گلیکولیک اسید کونژوگه شدند. از روش طیف سنجی (FT-IR) مادون قرمز و (AFM) میکروسکوپ نیروی اتمی برای تایید انجام کونژوگاسیون با نانو ذرات استفاده شده است. برای بررسی اندوتوکسین واکسن طراحی شده از روش بررسی کیت (L.A.L) لیمولوس آمیبوسیت لیسیت تست و برای کنترل تب بر روی خرگوش و میزان مرگ ومیر بر روی موش ها بررسی گردید. موفقیت کونژوگه های آنتی ژن و نانو ذرات بر اساس اندازه و شارژ نانو ذرات حاوی آنتی ژن تایید شد.

نتایج FT-IR و شکل پیک های مربوطه حضور گروه های عاملی آنتی ژن در ساختار نانوذره و تشکیل پیوند استری را تایید کردند. تصاویر حاصل از میکروسکوپ نیرواتمی نانو ذرات حاوی آنتی ژن لیپوپلی ساکارید و نانو ذرات قبل از کونژوگاسیون ، افزایش سایت های اتصالی نانو ذرات رانشان دادند. تغییر از حالت تیزی اولیه به پفکی پس از انجام کونژوگاسیون موفقیت حمل آنتی ژن توسط نانو ذرات را اثبات کرد. مشاهده نشدن تب در خرگوش و مرگ ومیر در موش ها اثبات گردید.

نتایج حاصل موثر بودن واکسن را در ایمنی زایی نشان دادند و بنابراین به عنوان کاندیدای واکسنی مناسب علیه بیماری های ناشی از کلبسیلاپنومونیه در مرحله اول کارآزمایی بالینی پیشنهاد می گردد.