بارگذاری آنتی ژن کایمر C-CfTXA-STxB زهر عروس دریایی در کوپلیمر سه بلوکه PLA-PEG-PLA و بررسی ایمنی زایی آن در موش سوری

زهر عروس دریایی حاوی انواع پروتیین های فعال زیستی است که می تواند جهت تهیه واکسن مورد بررسی قرار گیرد. پلی لاکتیک اسید، پلیمر زیست تخریب پذیر می باشد که در سامانه های واکسن کاربرد دارد. هدف از این مطالعه کپسوله سازی پروتیین کایمر نوترکیب C-CfTX1-STxB زهر عروس دریایی در کوپلیمر سه بلوکه PLA-PEG-PLA و بررسی تیتر آنتی بادی و ایمنی زایی ایجاد شده در موش سوری می باشد.

پس از تخلیص، تایید پروتیین توسط وسترن بلات انجام شد، سپس آنتی ژن درکوپلیمر سه بلوکه با استفاده از روش تبخیر حلال بارگذاری و خصوصیات نانوذرات تهیه شده توسط میکروسکوپ الکترونی و پراش نور پویا مورد بررسی قرار گرفت. در ادامه آنتی ژن کپسوله و آزاد به همراه ادجوانت فروند کامل و ناقص، PBS و PLA-PEG نانویی شده به موش های سوری در چهار نوبت به صورت زیر جلدی تزریق شد. در انتها میزان آنتی بادی تولید شده در سرم به دست آمده از حیوان آزمایشگاهی به وسیله الایزا غیر مستقیم اندازه گیری شد و زنده مانی حیوانات ایمن شده در چالش با زهر عروس دریایی مورد بررسی قرار گرفت.

نتایج بررسی نانوذرات تولیدی نشان داد که نانوذرات تهیه شده از کمیت و کیفیت خوبی برخوردارند. اندازه نانوذرات تولیدی 1/176 نانومتر و بازده کپسوله سازی پروتیین در نانوذرات برابر 71 درصد بود. در انتها نشان داده شد موش های ایمن شده پس از چالش با 50 برابر LD50 زهر عروس دریایی زنده ماندند و تیتر آنتی بادی تولیدی ارتباط مستقیمی با مقاومت حیوان آزمایشگاهی داشت.

با توجه به عدم خاصیت کاردیوتوکسیستی و نوروتوکسیستی پروتیین نوترکیب C-CfTX1-STxB و هم چنین نتایج به دست آمده می توان نانوذرات PLA-PEG-PLA را به عنوان حامل مناسب جهت تهیه واکسن علیه زهر عروس دریایی برای بررسی های بیش تر پیشنهاد داد.