همسانه سازی ژن hsp70 مایکوباکتریوم اویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس در پلاسمید pET-24a و بیان آن در باکتری اشریشیا کولای

بیماری یون (پاراتوبرکلوزیس) ناشی از باکتری مایکوباکتریوم اویوم پاراتوبرکلوزیس (Mycobacterium avium paratuberculosis; MAP) عفونت مزمن و پیشرونده ای بوده و به طور عمده نشخوارکنندگان را درگیر می سازد. این بیماری می تواند خسارات اقتصادی فراوانی را به صنعت دامپروری وارد سازد و ممکن است تهدیدی نیز برای بهداشت عمومی باشد، چون با انتقال از راه شیر و دیگر فراورده های دامی آلوده ممکن است انسان را نیز آلوده نماید. مقاومت و ایمنی در برابر بیماری یون، بیش تر به پاسخ ایمنی با واسطه سلولی مرتبط است. پروتیین شوک حرارتی 70 (heat shock protein70; HSP70) باکتری فوق، یکی از پروتیین های مهم آن می باشد که پاسخ ضد آن از دفع مدفوعی باکتری جلوگیری می کند. به منظور فراهم سازی تولید واکسن نوترکیب جهت مقابله با بیماری یون، در این مطالعه تولید HSP نوترکیب (recombinat HSP; rHSP) و بررسی ایمنی زایی آن در خرگوش مورد بررسی قرار گرفت. بدین منظور ژن hsp70 در پلاسمید pET-24a همسانه سازی گردید و پلاسمید نوترکیب حاصله به سویه BL21 باکتری اشریشیا کولای منتقل شد. بیان پروتیین فوق با استفاده از SDS-PAGE بررسی و صحت توالی نوکلیوتیدی با تعیین توالی، تایید گردید. تزریق rHSP70 به خرگوش با تولید سطح بالایی از آنتی بادی ضد آن همراه بود. بر اساس یافته ها، به نظر می رسد که آنتی بادی ضد rHSP70 را می توان در طراحی روش های تشخیصی بیماری و پروتیین نوترکیب تولیدشده را جهت تولید واکسن های نوترکیب مورد ارزیابی قرار داد.