تاثیر فاکتور های القایی بر توان رشد، کلون زایی و الگوی ژنتیکی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی ماهی آزاد دریای خزر در شرایط آزمایشگاهی

این مطالعه با هدف بررسی اثر فاکتور های مختلف رشد بر میزان تکثیر، کلون زایی و بیان برخی از ژن های اختصاصی سلول های اسپرماتوگونی ماهی آزاد دریای خزر در شرایط آزمایشگاهی طراحی شده است. سلول های اسپرماتوگونی از بافت بیضه بچه ماهیان آزاد دریای خزر با استفاده از روش هضم آنزیمی دو مرحله ای جداسازی و از طریق حذف تمایزی خالص سازی شدند. تعلیق سلولی حاوی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی در محیط کشت حاوی ترکیبی از فاکتور های مختلف رشد (bFGF، GDNF، IGF-I، EGF و LIF) به مدت چهارده روز کشت داده شدند. مساحت کلونی ها در روز چهاردهم در هر گروه اندازه گیری شد، همچنین از رنگ آمیزی ایمنوفلورسنت برای بررسی کیفی و کمی نشانگر DDX4/VASA در بین گروه های مختلف استفاده شد. بیان ژن های Vasa و Gfrα1 به عنوان ژن های اختصاصی سلول های زایا در گروه های مختلف مورد بررسی قرار گرفت. اندازه کلونی های اسپرماتوگونی در گروهی که تحت تاثیر چهار فاکتور رشد (bFGF+GDNF+IGF-1+EGF) قرار داشتند، به طور معنی داری بالاتر از سایر گروه های آزمایشی بود (001/0>P). با این وجود، در حضور LIF، اثر معنی داری بر روی تکثیر سلول های اسپرماتوگونی مشاهده نشد. رنگ آمیزی ایمنوفلورسنت نشان داد که کلونی های سلولی در گروه های مختلف برای نشانگر DDX4/VASA مثبت بودند و به جز گروه LIF اختلاف معنی داری در بین سایر گروه ها مشاهده نشد (05/0