تاثیر افزودن روغن بذر گل مغربی به رقیق کننده انجمادی بر پایه تریس بر کیفیت اسپرم قوچ رومانوف پس از انجماد و یخ گشایی

تحقیقات نشان داده اند که فرآوری و انجماد با تولید رادیکال‏های آزاد سبب کاهش جنبایی، زنده‏مانی و قدرت باروری اسپرم می شود. بنابراین استفاده از یک ترکیب با ویژگی آنتی اکسیدانتی طی این فرآیند ضروری به نظر می رسد. روغن بذرگل مغربی به دلیل داشتن ترکیبات فنولی دارای ویژگی آنتی اکسیدانتی است. هدف از پژوهش حاضر، بررسی اثر افزودن روغن بذر گل مغربی به رقیق کننده انجمادی بر کیفیت اسپرم قوچ پس از فرآیند انجماد و یخ گشایی است.

در این تحقیق از منی 5 راس قوچ رومانوف بالغ با میانگین سنی 3 تا 4 سال و میانگین وزنی 60 تا 65 کیلوگرم استفاده شد. جمع آوری منی با استفاده از واژن مصنوعی به صورت هفته ای دو بار انجام گرفت. برای افزودن روغن به گروه های تیماری از تویین-80 استفاده شد. تیمار های آزمایشی شامل تیمار شاهد بدون روغن گل مغربی، تیمار 1 دارای 25 میکرولیتر، تیمار 2 دارای 50 میکرولیتر و تیمار 3 دارای 100 میکرولیتر از روغن گل مغربی بود. نمونه های منی پس از جمع آوری به آزمایشگاه منتقل شد و ازنظر حجم، غلظت و جنبایی پیش رونده اسپرم بررسی شدند. درنهایت، نمونه های منی با رقیق کننده بر پایه تریس _ لستین سویا رقیق سازی و منجمد شد. پس از یخ گشایی فراسنجه های جنبایی کل و پیش رونده، درصد زنده مانی، یکپارچگی غشاء، فعالیت میتوکندریایی و پراکسیداسیون لیپیدی اسپرم تعیین گردید.

نتایج نشان داد که سطح 25 میکرولیتر روغن بذر گل مغربی توانست جنبایی کل اسپرم را نسبت به گروه کنترل بهبود ببخشد و در دیگر تیمارهای آزمایشی تفاوت معنی داری نسبت به گروه شاهد مشاهده نشد. در فراسنجه جنبایی پیش رونده بین تیمارهای 25 و 50 میکرولیتر با گروه شاهد تفاوت معنی داری مشاهده نشد ولی این فراسنجه در تیمار 100 میکرو لیتر نسبت به گروه های دیگر به طور معنی داری تفاوت نشان داد (01/0>P) افزودن سطوح 25 و 50 میکرولیتر روغن گل مغربی به رقیق کننده، صفت یکپارچگی غشا را نسبت به سطح 100 میکرولیتر و تیمار شاهد بهبود داد (01/0>P) ولی این بهبود در تیمار 25 میکرولیتر نسبت به سطح 50 میکرولیتر بیشتر بود (01/0>P). نتایج حاصل از ارزیابی فعالیت میتوکندری نشان داد که بیشترین درصد اسپرم دارای میتوکندری فعال در گروه های 25 و 50 میکرولیتر بود (01/0>P). نتایج حاصل از پر اکسیداسیون لیپیدی نشان داد که کمترین مقدار تولید مالون دی آلدیید مربوط به تیمار 25 میکرولیتر می باشد ولی با تیمار شاهد اختلاف معنی داری مشاهده نشد. نتایج حاصل از آزمایش آپوپتوز نشان داد که افزودن سطوح 25 و 50 میکرولیتر روغن گل مغربی باعث کاهش میزان آپوپتوز نسبت به گروه شاهد و سطح 100 میکرولیتر روغن گل مغربی گردید (01/0>P) .همچنین زنده مانی در تیمار 25و 50 میکرولیتر نسبت به دیگر تیمارها به طور معنی داری بالاتر بود (01/0>P). درنهایت اسپرم های مرده در تیمار 25 میکرو لیتر نسبت به دیگر گروه های آزمایشی کمتر بود و همین امر سبب اختلاف معنی دار این صفت در این سطح نسبت به دیگر سطوح گردید (01/0>P).

به طورکلی افزودن روغن گل مغربی در رقیق کننده انجمادی منجر به افزایش جنبایی، قابلیت زنده مانی و سلامت غشاء پلاسمایی و کاهش آپوپتوز اسپرم‏ها پس از انجماد-یخ گشایی می شود. با در نظر گرفتن همه فراسنجه های اندازه گیری شده، گروه مربوط به 25 میکرولیتر نسبت به سایر سطوح اثر حفاظتی بیشتری از خود نشان داد.