بیان و خالص سازی پروتئین RBD نوترکیب ویروس SARS COV-2 در سیستم بیانی پروکاریوتی به منظور ارزیابی آنتی بادی IgG موجود در سرم افراد بهبودیافته از بیماری کوید 1

زمینه و هدف یکی از مهمترین پروتیینهای ویروس 2-COV-SARS پروتیین S است که از دو زیرواحد 1S و 2S تشکیل شدهاست. مهمترین ناحیه در زیرواحد S1 ناحیه اتصال به رسپتور) RBD (است که نقش کلیدی در اتصال به رسپتورهای ACE راایفا میکند. RBD یک ناحیه حفاظت شده در پروتیین S است که هدف سیستم ایمنی و تولید آنتیبادی علیه ویروس است.باتوجه به اهمیت این ناحیه)در تولید آنتیبادیهای خنثیکننده(که میتواند انتخاب مناسبی جهت توسعه واکسن و تولیدکیتهای تشخیص سرولوژی باشد، ازاین رو در این مطالعه، میزان واکنش آنتیبادیهای موجود در سرم بیماران بهبودیافتهاز بیماری کوید 19 با استفاده از پروتیین RBD نوترکیب تولید شده درسیستم بیانی پروکاریوت به عنوان یک سیستم بیانیارزان قیمت بررسی شد.روش بررسی در این مطالعه سازه نوترکیب RBD-b22PET به میزبان باکتری اشرشیاکلی) 21BL (انتقال و سلولهای باکتری درمحیط کشت داده شد. سپس بیان پروتیین با استفاده از ایزوپروپیل بتادی تیوگالاکتوزید) IPTG (القا شد. بیان پروتیین نوترکیبRBD با استفاده از ژل اکریل آمید) SDS-PAGE (و وسترن بلات به تایید نهایی رسید. درپایان پروتیین موردنظر با استفادهازستون نیکل استخراج و در یک سنجش الیزای غیرمستقیم استفاده شد.یافته ها در مقایسه با سرم افراد سالم) 0.412Cut off: (افزایش معنیداری در میزان جذب نوری 30 نمونه سرمی به پروتیینRBD نوترکیب مشاهده نشد.نتیجه گیری پروتیین نوترکیب RBD تولیدشده در میزبان پروکاریوتی واکنش قابل توجهی به آنتیبادیهای موجود در سرمبیماران بهبودیافته از خود نشان نمیدهد و نمیتوان جهت اهداف تشخیصی از آن استفاده کرد.