بکارگیری کلبسیلاپنومونیه در تشخیص و تعیین بیوپلی مر پلولان و بهینه سازی فاکتورهای موثر بر فعالیت آن

کلبسیلا پنومونیه و باسیلوس اسیدوپلولیتیکوس و چند باکتری دیگر قادرند آنزیم پلولاناز را تولید کنند. آنزیم پلولاناز آنزیمی است که بطور اختصاصی بر روی بیوپلی مر پلولان اثر می کند، لذا این روش قابل اعتمادترین روش در شناسایی این پلیمر است. در این تحقیق از عمل آنزیم پلولاناز باکتری کلبسیلاپنومونیه در تشخیص و اندازه گیری کمی مقدار پلولان استفاده گردید. در این بررسی ابتدا کلبسیلا پنومونیه در محیط نوترینت آگار فعال و در محیط حاوی پلولان (سوبسترای اختصاصی آنزیم) بصورت کشت مقدماتی بمدت24 ساعت کشت داده شد. سپس 2 میلی لیتر از کشت مقدماتی فوق را به 18 میلی لیتر از همان محیط کشت اضافه و در دمای37 درجه سانتی گراد و هوادهی 120 دور در دقیقه انکوباتور قرار گرفت. فعا لیت آنزیمی این سویه با فاصله زمانی پنج ساعت اندازه گیری شد، و بیشترین فعالیت آنزیمی بعد از 10 ساعت دیده شد. فعالیت آنزیمی پلولاناز تولید شده برحسب مقدار گرم بر لیتر مالتوتریوز آزاد شده است، که بعد از ده ساعت32.43 گرم قند بر لیتر می باشد. فعالیت آنزیمی این سویه بر روی پلولان خالص در pH و دمای مختلف مطالعه گردید،pH، 5 و دمای 40 درجه سانتی گراد شرایط بهینه برای فعالیت این آنزیم است.