استفاده از آنتی بادی منوکلونال HS80 جهت شناسایی پروتئین آنتی ژنیک آن در سطح اسپرم انسان

از آنجایی که وقوع یک لقاح موفق نتیجه برهم کنش مناسب گیرنده ها و لیگاندهای مستقر در غشای دو سلول اسپرم و تخمک می باشد، بنابراین شناسایی وقایع مولکولی و گلیکوپروتئین های دخیل در این برهم کنش، با استفاده از آنتی بادی منوکلونال می تواند اطلاعات موجود در زمینه مکانیسم های دخیل در لقاح را افزایش داده و از طرف دیگر علت ناباروری های ناشی از نقایص مولکولی و یا ناباروری های با علت ایمونولوژیک را روشن سازد.
بعد از تولید آنتی بادی های منوکلونال علیه آنتی ژن های سطحی اسپرماتوزوای انسانی، جهت تولید انبوه آنتی بادی با کشت سلول هیبریدوم در صفاق موش و ایجاد آسیت، مقادیر زیادی آنتی بادی تولید گردید. آنتی ژن های سطحی اسپرم های نرمال با استفاده از دو ترکیب NaCl و LIS به طور جداگانه استخراج شد. جهت تعیین محل آنتی ژن مورد نظر، آزمون ایمونوفلورسانس غیرمستقیم با استفاده از آنتی بادی HS80 صورت گرفت. در ضمن به منظور تعیین وزن مولکولی آنتی ژن مورد نظر، آزمون ایمونوبلاتینگ پروتئین های استخراجی انجام شد.
بعد از تزریق سلول هیبریدوم HS80 به صفاق هر موش حدود mg 5/13 آنتی بادی ازمجموع پنج موش به دست آمد. به دنبال رنگ آمیزی ایمونوفلورسانس در ناحیه آکروزومی و در قسمت کوچکی از ناحیه گردن، فلورسانس درخشانی بین تمام جمعیت سلول های اسپرمی مشخص گردید. در عین حال بعد از آزمون ایمونوبلاتینگ، وزنی در محدوده 4 ±80 کیلو دالتون برای آنتی ژن مورد نظر (HS80) محاسبه شد.
حضور آنتی ژن مزبور در ناحیه تحت استوایی سر اسپرم، احتمال داشتن نقشی در فرایندهای حیاتی اسپرم از جمله اتصال به غشای سیتوپلاسمی تخمک را در مورد این آنتی ژن افزایش می دهد و امکان دارد اتصال این آنتی بادی به اسپرم بتواند در شرایط فیزیولوژیک بر روند لقاح تاثیر محسوسی داشته باشد که می تواند این امر موضوع تحقیقات بعدی قرار گیرد.