بررسی اثر سرب بر رشد سلول های استئوبلاست مهره ستون فقرات جنین انسان و بیان ژن bax در محیط کشت

بافت استخوان مرکز عمده تجمع سرب محسوب شده و به عنوان یکی از اهداف اصلی سمیت این فلز سنگین مطرح است. در مطالعه حاضر ما اثر سرب را بر رشد سلول های کشت اولیه ستون مهره جنین انسان و بیان پروتئین Bax بررسی کردیم.
نوع مطالعه حاضر آزمایشگاهی است. به این منظور ابتدا کشت اولیه از سلول های ستون مهره جنین انسان پس از هضم آنزیمی بافت تهیه شد و میزان حضور سلول های استئوبلاست در کشت با بررسی آنزیم آلکالین فسفاتاز تعیین گردید. سپس اثر مجاورت با رقت های ده میکرومول تا 5/1 میلی مول سرب بر تکثیر سلول در محیط کشت حاوی 5 و 10% سرم جنین گاوی (Fetal Bovine Serum، FBS)با روش سنجش MTT (Methyl Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide) بررسی شد. در ادامه، اثر 1/0 میکرومول سرب، بر بیان ژن bax، با روش ایمونوسیتوشیمی بررسی شد.
درصد سلول های استئوبلاست در کشت اولیه با بررسی آنزیم آلکالین فسفاتاز، 80 تا 85% تعیین شد. رقت های 100 تا 1500 میکرومول سرب تکثیر سلول را در محیط کشت حاوی 10%، 40 تا 81% افزایش داد و بیشترین تحریک رشد در رقت یک میلی مول مشاهده شد (001/0p<). هم زمان با کاهشFBS، فعالیت های مهاری و تکثیری سرب افزایش یافت، به ترتیبی که در رقت های بین 10 تا 1000 میکرومول رشد سلول بین 15 تا 103% افزایش یافت، و در رقت 5/1 میلی مول، 72% کاهش رشد مشاهده شد (01/0p<). بیشترین تحریک تکثیر سلول در رقت 500 میکرومول اعمال شد (001/0p<).
مجاورت سلول ها با یک دهم میکرومول سرب، افزایش پروتئین Bax را در سیتوپلاسم سلول نسبت به کشت کنترل به دنبال داشت. نتایج این مطالعه، احتمال اختلال در عملکرد فیزیولوژیک طبیعی بافت استخوان به وسیله سرب را مطرح می کند.