جداسازی سلول های بنیادی مزانشیمی از مغز استخوان موش با تعویض مداوم محیط کشت

از ویژگی های منحصر به فرد سلول های بنیادی مزانشیمی که از آن در جداسازی استفاده شده است توانایی چسبیدن به پلاستیک است. به کارگیری این ویژگی در جداسازی سلول های بنیادی مزانشیمی گونه های مختلف پستانداران به جز موش با موفقیت همراه بوده است. در مطالعه حاضر با بهینه سازی روش چسبیدن به سطح ظرف پلاستیکی، جمعیت هموژن سلول های بنیادی مزانشیمی از مغز استخوان موش جداسازی شد. اساس این روش بر تعویض مداوم محیط کشت بلافاصله پس از کشت سلول های مغز استخوان است.
موش های نژاد Balb/c کشته شدند و مغز استخوان از فمور و تیبیا خارج و در ظرف شش خانه ای کشت گردید. سه ساعت پس از آغاز کشت محیط کشت رویی دور ریخته شد و محیط جدید اضافه گردید. تعویض محیط کشت در هر هشت ساعت و در فاصله زمانی 72 ساعت ادامه داشت. این کشت تا زمان پرشدن نسبی ظرف توسط سلول های فیبروبلاستی نگهداری شد و پس از آن پاساژ اول انجام گرفت. این سلول ها برای مطالعات بیشتر مورد بررسی قرار گرفتند. به منظور اثبات ماهیت مزانشیمی، سلول ها به دودمان های مزانشیمی تمایز داده شدند. در ضمن سلول مورد نظر از نظر کلونوژنیک بودن و آنتی ژن های سطح سلول مورد ارزیابی قرار گرفتند.
در این مطالعه دو هفته پس از کشت اولیه، جمعیت خالص از سلول های شبه فیبروبلاستی به دست آمد. این سلول ها که در آن ها مارکرهای سطحی CD90، Sca-l، CD44 بیان داشت، به آسانی به استخوان و چربی تمایز یافتند.
به نظر می رسد، روش ما روش توانمندی در جداسازی جمعیت خالص از سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان موش است.