بررسی خصوصیات سینتیکی پراکسیداز در عصاره برگ کلزا (Brassica napus var. okapi)

پراکسیداز(EC 1.11.1.7) یکی از پروتئینهای آهن دار گیاهی است که کاربرد گسترده ای در تشخیصهای پزشکی و تجربیات آزمایشگاهی مختلف دارد، بهمین علت امروزه تلاش زیادی صورت می گیرد تا منابع جدیدی از بافتهای گیاهی با فعالیت پراکسیدازی مناسب معرفی گردد. کلزا (Brassica napus) گیاهی علفی و یکساله است که اساسا بخاطر ارزش دانه های روغنی آن کشت می شود و بدلیل نزدیکی به ترب کوهی، منبع تجاری پراکسیداز، می تواند در این رابطه از قابلیتهای لازم برخوردار باشد. در پژوهش حاضر از برگهای شماره 5، 6 و7 مرحله طوقه ای رقم پاییزه اکاپی عصاره گیری شد. سنجش فعالیت آنزیم و عوامل موثر بر سینتیک آنزیم در طول موج nm 470 و دمای 25 درجه سانتی گراد بررسی شد. نتایج حاصل نشان داد که حداکثر فعالیت آنزیم در دمای بهینه 50 درجه سانتی گراد و pH بهینه 6 می باشد. همچنین آنزیم در محدوده 5/7-5/4 pH از پایداری بالایی برخوردار است و دماهای 55-25 سانتی گراد را تا 30 دقیقه براحتی تحمل می کند بدون اینکه فعالیت آن تغییر قابل ملاحظه ای کند اما در دمای 70-60 سانتی گراد بسرعت غیرفعال می شود. بررسی تاثیر حضور نمکهای مختلفNa+،K+، Zn2+، Ba2+، Ca2+، Co2+، Ni2+ در غلظتهای mM 6/0-3/0 در مخلوط واکنش نشان داد کهNa+، K+ و Zn2+ بر فعالیت آنزیم پراکسیداز برگ کلزا دارای اثر تحریک کننده، Co2+ و Ni2+ دارای اثر بازدارنده و دو یون Ca2+ و Ba2+ با هر غلظت اثرات متفاوتی را ایجاد می کنند. همچنین مقایسه تاثیر غلظتهای مختلف دو بازدارنده سدیم سیانید و سدیم آزاید نشان داد که سدیم سیانید اثر بازدارندگی قویتری بر پراکسیداز کلزا دارد. در حضور غلظت 002/0 میلی مولار سدیم سیانید، فعالیت آنزیم در مقایسه با نمونه شاهد به نصف می رسد.