ساخت سلول های E.coli نوترکیب خودتخریب گر تولید کننده پلاستیک زیستی با روش همسانه سازی همزمان ژنهای phb و ژن لیز کننده E

تولید روزافزون پلیمرهای مقاوم به تخریب زیستی مشکلات زیست محیطی فراوانی ایجاد می کند. بهترین راه حل برای این معضل، تولید پلیمرهای زیست تخریب پذیر می باشد. یکی از مهمترین انواع این پلیمرها پلی β هیدروکسی بوتیرات (PHB) است. باکتری Ralstonia eutropha به خاطر توانایی تولید مقادیر بالایی از PHB بسیار مورد مطالعه قرار گرفته است. در این باکتری PHB از استیل کوآ و طی سه مرحله توسط آنزیمهای، NADPH-dependent acetyl-coA reductase β- ketothiolas و PHA synthase ساخته می شود. ژنهای کد کننده این سه آنزیم به صورت اپرون در باکتری قرار گرفته اند. در تحقیق حاضر این اپرون از باکتری R. eutropha به همراه ژن E-lysis از باکتریوفاژ phix174 در باکتری E. coli ترانسفورم شد. ژن E تحت کنترل پروموتر T7 در پلاسمید pET28a و اپرون phb تحت کنترل پروموتر طبیعی خود در پلاسمید pTZ57R/T کلون شد و در نهایت هر دو پلاسمید در یک سلول E.coli ترانسفورم گردید. پس از رسیدن باکتری به فاز لگاریتمی رشد و بیان اپرونphb، القاء توسط IPTG صورت گرفت تا ژن E نیز بیان شود. هدف از انجام این تحقیق تولید سلولهای لیز شونده خودکار E. coli است که تولید کننده پلاستیک زیستی می باشند.