راه اندازی و به کارگیری یک روش Multiplex Real-time RT-PCR حساس برای تشخیص همزمان ویروس نقص ایمنی انسانی نوع 1 و ویروس هپاتیت C در نمونه های پلاسما

ویروس نقص ایمنی انسانی نوع 1 و ویروس هپاتیت C از جمله مهم‎ترین عوامل عفونی منتقل شونده از طریق خون محسوب می شوند و از این رو تشخیص صحیح، دقیق و حساس این ویروس ها در افراد آلوده و خون های اهدایی از اهمیت بسیاری برخوردار است. به علت وجود برخی از محدودیت های روش های سرولوژیک در تشخیص این عوامل عفونی، هدف این مطالعه استفاده از روش های مولکولی سریع و حساس همچون Real-time PCR می‎باشد.
در این مطالعه آزمایشگاهی، یک روش Real-time PCR Multiplex خانگی بر مبنای استفاده از رنگ SYBR GreenI راه اندازی شد که در آن با استفاده از آنالیز منحنی ذوب می توان عفونت منفرد و یا هم زمان ویروس نقص ایمنی انسانی نوع 1 و ویروس هپاتیت C را در نمونه های پلاسمای بیماران شناسایی نمود. آنالیز آماری با استفاده از نرم افزار SPSS نسخه 16 انجام شد نتایج به دست آمده از انجام واکنش های مختلف بر روی چندین نمونه بالینی نشان داد که حساسیت تجزی های (آنالیتیکی) روش راه اندازی شده برای ویروس نقص سیستم ایمنی نوع 1 معادل 200 کپی در هر میلی لیتر 200 و برای ویروس هپاتیت C برابر 100 کپی در هر میلی لیتر است. به علاوه نشان داده شد که پرایمرهای طراحی شده برای هر ویروس هیچ گونه واکنش متقاطعی با یکدیگر و سایر عوامل مداخله گر ندارند.
با توجه به سطح حساسیت و ویژگی مناسب، کاربرد آسان، هزینه نسبتا کم و آنالیز سریع نمونه ها، این روش می تواند یک روش سریع و مناسب برای تشخیص موثر و آسان ویروس نقص ایمنی انسانی نوع 1 و ویروس هپاتیت C در نمونه های پلاسما باشد.