بررسی روند تمایز سلول های شبه کاردیومیوسیت مشتق از سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان انسان در محیط آزمایشگاه

بررسی چگونگی روند تمایز سلول های شبه کاردیومیوسیت مشتق از سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان انسان، تحت تاثیر 5-azacytidine (5-aza) درشرایط آزمایشگاهی سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان انسان پس از تخلیص به مدت 5 هفته برای القای تمایز کاردیومیوسیتی تحت تاثیر 5-aza با غلظت 5 میکرومول قرار گرفتند. برای القای تمایز کاردیومیوسیتی، محیط کشت سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان انسان، به طور متوالی هر 24 ساعت یک بار تعویض شد، بدین ترتیب که سلول ها 24 ساعت در محیط کشت حاوی 5-aza و 24 ساعت در محیط کشت فاقد این ماده قرار گرفتند و این روند تا زمان نمونه برداری ادامه داشت. برای بررسی روند تمایز سلول ها از مقایسه الگو و میزان بیان mRNA ژن های اختصاصی قلبی شامل اکتینین آلفا، زنجیره سنگین میوزین و کانکسین-43 با روش RT-PCR در پایان هفته های اول تا پنجم پس از القا و همچنین بیان پروتئین های اختصاصی اکتینین-آلفا، تروپونین قلبی و کانکسین-43 در پایان هفته سوم و پنجم پس از القا با روش فلوسایتومتری استفاده شد.
mRNA ژن های مورد بررسی به صورت الگویی وابسته به زمان بیان شدند، به نحوی که mRNA های ژن های α-actinin و Connexin-43 در تمام نمونه های هفته اول تا پنجم، با روندی صعودی بیان شدند و بیان mRNA های ژن MHC در هفته 4 بیشترین میزان را داشت. میزان بیان پروتئین های اکتینین-آلفا و تروپونین قلبی در هفته های سوم و پنجم پس از القا با یکدیگر برابر، اما جمعیت سلول های بیان کننده پروتئین کانکسین-43 از هفته سوم تا پنجم افزایش یافته بود.
مطالعه حاضر نشان داد که سلول های بنیادی مزانشیمی می توانند تحت تاثیر 5-aza با غلظت 5 میکرومول به کاردیومیوسیت تمایز پیدا کنند و با افزایش مدت زمان القا، کاردیومیوسیت ها تکوین یافته تر می شوند.