هدف گیری ذرات فاژی M13 با پروتئین هولوترانسفرین انسانی به روش اتصال شیمیایی

انتقال هدفمند ناقل ها و حامل های ژنی به سلول ها و بافت های خاص یکی از مهمترین مسائل در آزمایش های ژن درمانی است. باکتریوفاژها حامل-های ژنی مناسبی هستند و روش های مختلفی برای انتقال هدفمند آن ها به سلول های مورد نظر وجود دارد. در این مطالعه تهیه ذرات فاژی هدفمند شده بر پایه فاژ M13 به روش اتصال شیمیایی ارائه می شود.

ابتدا سازه فاژمیدی pCMV-Script-GFP از ذرات فاژی GFP توسط فاژ کمکی ExAssist به روش برش درون سلولی با استفاده از سویه میزبان اختصاصی XLOLR برش و با استفاده از فاژ کمکی R408 ذرات فاژیM13حاوی ژن GFP (M13-GFP)تولید شدند. سپس ملکول های پروتئین هولوترانسفرین انسانی با روش اتصال شیمیایی آمیناسیون احیایی به سطح ذرات فاژی حاصل اتصال داده شدند. اتصال ملکول های ترانسفرین به سطح ذرات فاژی با روش phage-ELISA بررسی شد.

آزمایشات phage-ELISA نشان داد که اتصال ملکولهای ترانسفرین به سطح ذرات فاژی به درستی انجام گرفته و ذرات فاژیM13 هدفگیری شده با ترانسفرین تهیه شده است. بررسی های بیشتر نشان داد که تقریبا 485 مولکول ترانسفرین به هر ذره فاژی متصل شده است.

نتایج حاصل نشان می دهند که روش اتصالات شیمیایی می تواند به عنوان راهکاری مناسب در هدفمندسازی ذرات فاژی M13 با اتصال مولکول های هدفگیری به تعداد زیاد به سطح آن ها مورد استفاده قرار گیرد.