مطالعه فعالیت و ارزیابی اثرات pH و دما بر سرین پروتئاز و سیستئین پروتئاز در کرم بالغ فاسیولا هپاتیکا

فاسیولوزیس یک بیماری انگلی مشترک است که توسط ترماتود فاسیولا هپاتیکا ایجاد می شود. پروتئازها جهت بقای انگل ها ضروری می باشند. هدف از این مطالعه جهت بررسی فعالیت و مطالعه اثرات pH و دما بر سرین پروتئاز و سیستئین پروتئاز در ترماتود فاسیولا هپاتیکا بود. ترماتودهای بالغ فاسیولا هپاتیکا از کبد گاوهای کشتار شده در کشتارگاه شهرستان ارومیه جدا شدند و میزان پروتئین آن ها اندازه گیری شد. فعالیت پروتئولیتیک عصاره کرم بالغ با استفاده از سوبسترای آزوکازئین در محدوده pH 2 تا 12 موردبررسی قرار گرفت. سوبسترای ویژه تریپسین، کیموتریپسین و کاتپسین B برای سنجش آنزیم های پروتئازی استفاده شد. اثر مهارکننده های پروتئازی پپساتین، DTT، PMSF و EDTA بر روی این آنزیم ها بررسی شد. برآورد دما و pH بهینه در محدوده دمایی 90-10 درجه سانتی گراد و 12-2 pH بود. pH بهینه فعالیت برای تریپسین و کیموتریپسین قلیایی و فعالیت پروتئولیتیکی و کاتپسین B اسیدی بود. فعالیت سرین پروتئاز و سیستئین پروتئاز در فاسیولا هپاتیکا ثبت گردید. دمای بهینه برای فعالیت تریپسین و کیموتریپسین در 50 درجه سانتی گراد و کاتپسین B در 40-30 درجه سانتی گراد بود. هر سه پروتئاز پایداری دمایی تا 40 درجه سانتی گراد را نشان دادند. ثبات دمایی بالای پروتئازهای فاسیولا هپاتیکا نشان داد که به عنوان یک عامل بالقوه می توانند کاربردی زیستی در تهیه واکسن و داروهای ضد انگلی داشته باشند.