ارزیابی پتانسیل تشخیصی و توانایی DIVA پروتئین نوترکیب LigBCon1-5 مربوط به لپتوسپیرا اینتروگانس سرووار پومونا در لپتوسپیروز سگ

لپتوسپیروز سگ یک نگرانی جدی در بهداشت عمومی است.

این مطالعه با هدف بررسی قابلیت ناحیه محافظت شده 1 تا 5 آنتی ژن نوترکیب شبه ایمنوگلوبولین پروتئین B لپتوسپیرا (rLigBCon1-5) به عنوان یک نشانگر تشخیصی سرمی برای تشخیص لپتوسپیروز سگ است.

در مجموع 340 نمونه سرمی گرفته شده از سگ های غیر واکسینه با استفاده از آزمون میکروسکپی آگلوتیناسیون (MAT) و rLigBCon1-5 بر پایه سنجش جذب ایمنی وابسته به آنزیم غیر مستقیم (I-ELISA) ایمونوگلوبولین G  (IgG)غربال شدند. علاوه بر این، 60 نمونه سرمی سگ های واکسینه شده نیز با استفاده از MAT و rLigBCon1-5 مبتنی بر تست آگلوتیناسیون لاتکس (LAT) غربال شدند.

نتایج آزمون میکروسکپی آگلوتیناسیون نشان داد که 6/28% از نظر سرولوژی مثبت بودند. حساسیت نسبی، ویژگی و دقت  IgG I-ELISA در مقایسه با MAT به ترتیب 100%، 0/96%، و 2/97% بود. از 60 سرم واکسینه شده 46 سرم فقط با MAT، و 8 سرم با هر دو تست واکنش دادند، در حالی که 6 سرم با هر دو تست واکنش ندادند. آنتی بادی های ضد LigB با استفاده از rLigBCon1-5 مبتنی بر LAT در 8 سرم از سگ ها شناسایی شدند. در 5 مورد از سرم های واکنش دهنده با LAT، آگلوتینین های سرووارهای لپتوسپیرا محلی در گردش شامل گریپوتیفوزا (4 عدد) و استرالیس (1 عدد) شناسایی شدند. در 3 مورد از سرم های واکنش دهنده در LAT، آگلوتینین های ضد ایکتروهموراژی (3 عدد) تولید شده به علت عفونت طبیعی، مشاهده شدند.

می توان آزمون ELISA غیر مستقیم ایمونوگلوبولین G (IgG I-ELISA)را به عنوان آزمون جایگزین MAT استفاده کرد. rLigBCon1-5 مبتنی بر LAT در 8 سرم واکسینه شده آنتی بادی های ضد LigB را شناسایی کرد که در آنجا شکست واکسن به دلیل محدود بودن طیف اثربخشی Nobivac® RL و عدم رعایت زنجیره سرد، به طور نسبی یا کامل رخ داد. این واکسن نمی تواند محافظت متقاطع را علیه سرووارهای لپتوسپیرا محلی در حال گردش را ایجاد کند. آنتی ژن نوترکیب LigBCon1-5 بر پایه LAT زمانی که به عنوان تست pen-side برای شناسایی لپتوسپیروز سگ به کار گرفته شود دارای قابلیت تمایز افراد آلوده از واکسینه شده (DIVA) است.