سنجش پلاریزاسیون فلورسنس با استفاده از پروتئین نوترکیب ESAT-6 برای تشخیص آنتی بادی ها علیه مایکوباکتریوم بوویس بیماری زا در گاو

پیشینه:

 سل گاوی (bTB) یک بیماری مهم باکتریایی است که سبب ضرر اقتصادی قابل توجهی در سراسر جهان می شود.

مطالعه ما بر پایه استفاده از روش پلاریزاسیون فلورسنس (FPA) بود که از پروتیین ESAT-6 لیبل شده با فلورسیین برای شناسایی آنتی بادی های مایکوباکتریوم بوویس در سرم گاوی استفاده می کند.

پروتیین ESAT-6 در FPA مورد استفاده قرار گرفت. راکتورهای سل گاوی توسط تست داخل جلدی مقایسه ای (CID) و تست اینترفرون گاما (IFN-γ) مثبت تشخیص داده شدند. آنتی بادی ها علیه مایکوباکتریوم بوویس با استفاده از یک ردیاب نشان دار شده با فلورسیین ایزوتیوسیانات (FITC) و یک ردیاب نشان دار شده با FITC کشت کامل در گاوهای مثبت شناسایی شدند.

از 192 حیوان آزمایش شده برای bTB، 37 حیوان با استفاده از هر یک از دو روش CID یا IFN-γ مثبت بودند. با استفاده از مقادیر mP بدست آمده از 5 نمونه کشت مثبت سرم، مقدار قطع بیش از mP 127 بهترین تمایز را بین حیوان های bTB مثبت و منفی ارایه کرد. نتایج ESAT-6 حاصل از FPA در مقایسه با نتایج CID، 9/92% حساسیت و 6/64% ویژگی و در مقایسه با نتایج IFN-γ، 7/95% حساسیت و 49% ویژگی را نشان داد. FPA با استفاده از ESAT-6 لیبل شده با FITC به عنوان یک ردیاب، دارای حساسیت (7/95%) و ویژگی (1/49%) بهتری در مقایسه با آزمون IFN-γ در پاسخ ایمنی همورال در حیوانات است.

نتیجه گیری: 

این مطالعه نشان داد که پروتیین ESAT-6 به عنوان یک آنتی ژن می تواند در تشخیص bTB با استفاده از یک آزمون همورال کاربردی و حساس مورد استفاده قرار گیرد.