تعیین ویژگی های آدنوویروس پرندگان، نوع 4، عامل سندرم هیدروپریکاردیوم در جوجه های گوشتی در کراچی پاکستان

در حومه شهر کراچی پاکستان و بین سال های 1990 تا 2003، آدنوویروس طیور از عفونت های طبیعی پرندگان جداسازی شد. این ویروس به عنوان عامل سندرم هیدروپریکاردیوم در طیور شناخته شده است. میزان مرگ و میر در گله های گوشتی تجاری مبتلا 20 تا 50% گزارش شد. در ابتدا 50 نمونه جمع آوری شد که از این میان، شش نمونه برای مطالعات مولکولی انتخاب شدند. جدایه های مورد بررسی به کشت سلولی کبد جنین مرغ تلقیح شده و پس از تکثیر با استفاده از روش هایی نظیر تعیین بیماری زایی ویروس در جنین مرغ، رسوب در ژل آگار، آزمون خنثی سازی سرم، استخراج DNA، واکنش زنجیره ای پلیمراز و آنالیز هضم آنزیم، خواص متنوع آن ها مورد بررسی قرار گرفتند. جهت تایید اینکه جدایه های مورد نظر، آدنوویروس نوع 4 هستند از سویه رفرانس)829(ATCC VR- -A2J استفاده شد. برای ایجاد بیماری تجربی، عصاره سلول های عفونی شده به روش عضلانی به جوجه های گوشتی با سن 28 روز تلقیح شد. هیدروپریکاردیوم تیپیک 72 ساعت پس از تلقیح ویروس به جوجه های تجربی مشاهده شد. حداکثر عیار خنثی کنندگی 50% در مخلوط سرم های طیور مورد تلقیح بیش از 40/1 نبود. نتایج آزمون PCR که در آن از آغازگرهای H3/H4 استفاده شد یک محصول 1319 bp که شاخص وجود آدنوویروس های گروه یک پرندگان است را نشان داد. آزمون RFLP که با استفاده از آنزیم HpaII انجام شد پنج باند از محصولات PCR ایجاد کرد که موید وجود آدنوویروس پرندگان در نمونه های مورد آزمایش بود.