کشت سلولی اولیه هیپوفیز ماهی کپور معمولی و ارزیابی تاثیر ترشحات آن بر فعالیت اندوکرینی فولیکول های تخمدانی انکوبه شده

در این تحقیق غده هیپوفیز پنج ماهی کپور معمولی جمع آوری شد. سلول های هیپوفیزی به روش آنزیمی جداسازی و به صورت یک لایه ای در محیط MEM (Minimum Essential Medium Eagle) کشت و به مدت 72 ساعت در دمای 22 درجه سانتی گراد انکوبه شدند. پس از سانتریفوژ‍ نمودن میکروپلیت ها، محیط کشت سلول های هیپوفیز (CPS) جمع آوری و در دمای 20- درجه سانتی گراد نگهداری شد. همچنین فولیکول های تخمدانی یک قطعه ماهی کپور مولد نیز جداسازی و در محیط BSS (Basic salt solution) Cortland به مدت 48 ساعت در دمای 20 درجه سانتی گراد انکوبه شد. سپس فولیکول های تخمدانی انکوبه شده به دو گروه تقسیم شدند: گروه کنترل شامل فولیکول های انکوبه شده در محیط BSS و گروه آزمایش شامل فولیکول های انکوبه شده در محیط BSS که مقادیر مختلف CPS (50، 100 و200 میکرولیتر/میلی لیتر) به آن افزوده شده بود. پس از 24 ساعت میکروپلیت ها سانتریفوژ شده،‍ مایع سطحی برداشته و مقدار هورمون های E2 و P4 موجود به روش RIA اندازه گیری شدند. با توجه به نتایج، افزودن کمترین مقدار CPS (50 میکرولیتر/میلی لیتر)، به طور معنی داری ترشح هورمون های E2 و P4 را از فولیکول های تخمدانی انکوبه شده نسبت به گروه کنترل افزایش داد (P<0.05)، در حالیکه بالاترین مقدار CPS (200 میکرولیتر/میلی لیتر) باعث کاهش معنی دار ترشح استروییدی فولیکول های تخمدانی شد (P<0.05). مقدار 100 میکرولیتر/میلی لیتر تاثیر معنی داری بر ترشح استروییدی فولیکول های تخمدانی نداشت (P>0.05).