به جمع مشترکان مگیران بپیوندید!

تنها با پرداخت 70 هزارتومان حق اشتراک سالانه به متن مقالات دسترسی داشته باشید و 100 مقاله را بدون هزینه دیگری دریافت کنید.

برای پرداخت حق اشتراک اگر عضو هستید وارد شوید در غیر این صورت حساب کاربری جدید ایجاد کنید

عضویت
جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه

polymorphism

در نشریات گروه علوم دام
تکرار جستجوی کلیدواژه polymorphism در نشریات گروه کشاورزی
  • رضا توحیدی*، علی جوادمنش، الیاس ابراهیمی خرم آبادی، کمال قاسمی بزدی

    گوسفند، به عنوان یک مدل ژنتیکی برای مطالعه ارتباط بین تنوع ژنتیکی و میزان تخمک‎گذاری در تحقیقات پیشین مورد استفاده قرار گرفته است. مطالعات اخیر نشان داده است که تنوع در میزان تخمک‎گذاری و صفت چندقلوزایی می توانند توسط مجموعه ژن‎هایی به نام ژن‎های کنترل کننده باروری کنترل شوند. در این راستا، سه ژن عملکرد باروری به نام‎های BMPR1B یا FecB، GDF9 یا FecG و BMP15 یا FecX در گوسفند شناسایی شده‎اند. روش مولکولی Tetra-ARMS PCR یک جایگزین مناسب برای روش های پرهزینه مانند توالی‎یابی و PCR-RFLP در شناسایی اسنیپ‎هایی است که توالی آنها شناخته شده هستند. در سالهای اخیر، ورود آلل برولا به نژاد گوسفند افشاری کشور موارد چند تخمک‎گذاری را افزایش داد. هدف از مطالعه حاضر، بررسی چند شکلی دو ژن باروری شامل FecB و FecG در گوسفندان نژاد مغانی، افشاری و بلوچی خراسان رضوی و ارتباط آن‎ها با صفت چندقلوزایی بود. نمونه‎های خون از مجموع، تعداد 95 راس گوسفند افشاری، بلوچی و مغانی از طریق ورید وداجی اخذ شد. دو جفت آغازگر کنترل (خارجی) و اختصاصی (داخلی) برای تکثیر قطعات ژن‎های FecB و FecG در روش Tetra-ARMS PCR مورد استفاده قرار گرفتند. برنامه دمایی برای تکثیر قطعات ژن FecB به صورت واسرشت سازی اولیه در C 94 به مدت 4 دقیقه، سپس، 35 چرخه دمایی به ترتیب C 94 به مدت 25 ثانیه، دمای اتصال در C 54 به مدت 35 ثانیه، بسط در دمای C 72 به مدت 20 ثانیه و بسط نهایی در C 72 به مدت 5 دقیقه انجام شد. برای تکثیر قطعات ژن FecG از دمای اتصال C 54 به مدت 35 ثانیه، بسط در دمای C 70 به مدت 40 ثانیه و دمای بسط نهایی C 70 به مدت 5 دقیقه استفاده شد. در بررسی نتایج بدست آمده، سه ژنوتیپ برای ژن FecB در گوسفند افشاری شامل هموزیگوت وحشی، هتروزیگوت و هموزیگوت جهش یافته مشاهده شدند. همه گوسفندان بلوچی و گوسفند مغانی برای این ژن هموزیگوت وحشی بودند. فراوانی ژنوتیپ هموزیگوت وحشی برای سه نژاد گوسفند فوق الذکر بالا بود. فراوانی آلل وحشی در این نژاد 39/0 و فراوانی آلل جهش یافته 61/0 بود، در مجموع، برای سه نژاد به ترتیب 8/0 و 2/0 اندازه گیری شد. نتیجه Tetra-ARMS PCR برای جهش نقطه‎ای G1 ‏درجایگاه GDF9 برای همه نژادها چندشکلی نشان داد. هرچند، فراوانی هموزیگوت وحشی بالا بود. برای نژاد گوسفند بلوچی فقط چهار درصد از حیوانات ژنوتیپ هتروزیگوت داشتند و 96 درصد حیوانات ژنوتیپ وحشی را نشان دادند. برای نژاد گوسفند مغانی 16 درصد ژنوتیپ هتروزیگوت را نشان دادند و فقط چهار درصد از حیوانات ژنوتیپ هموزیگوت جهش یافته داشتند. همچنین، تنها یک ژنوتیپ هتروزیگوت در نژاد افشاری مشاهده شد. مطالعات متعددی ارتباط بین ژن‎های FecB، FecG و FecX را با چند قلوزایی در گوسفند نشان داده است. به دلیل فراوانی بالای هموزیگوت وحشی و این حقیقت که میش‎های بلوچی و مغانی عمدتا، تک قلوزا بودند، نقش جهش FecB در چند قلوزایی گوسفند افشار ی می‎تواند قابل توجه باشد. قوچ مورد استفاده در این گله هتروزیگوت بود. به طور کلی، می توان نتیجه گرفت که آلل جهش یافته FecB با چندقلوزایی گوسفندان ایرانی ارتیاط دارد. هرچند، تایید آماری این موضوع نیاز به یک مطالعه اختصاصی همرا با ثبت دقیق رکورد صفات تولید مثلی دارد. نتایج این مطالعه چندشکلی آلل برولا در میش‎های افشاری که فرزندان یک قوچ ژنوتیپ هتروزیگوت بودند را نشان داد. همچنین، کل این میش‎ها در شکم اول و 50 درصد آن‎ها در شکم دوم چند قلوزا بودند. بنابراین، جهش برولا ممکن است باعث چند قلوزایی در میش‎ها ‎شود. هرچند، تایید ارتباط چندشکلی‎های ژنی مرتبط با افزایش باروری و چندقلوزایی نیاز به مطالعه جامع تری به همراه اندازه‎گیری شاخص‎هایی مانند غلظت هورمون‎های جنسی، میزان تخمک‎گذاری و اندازه فولیکول‎ها دارد.

    کلید واژگان: ژن کاندید، باروری، چندشکلی، گوسفند
    Reza Tohidi *, Ali Javadmanesh, Elias Ebrahimi Khoramabadi, Kamal Ghasemi Bezdi

    Sheep are used as a genetic model to study the relationship between genetic diversity and ovulation rate. Previous studies have shown that ovulation rate and litter size can be controlled by a set of genes called fecundity genes . Three fertility genes have been identified in sheep called BMPR1B or FecB, GDF9 or FecG and BMP15 or FecX. Tetra-ARMS-PCR is a suitable alternative method in the context of expensive methods such as sequencing and PCR-RFLP to identify SNPs whose sequences are known. The entry of the Booroola allele into the Afshari breed increased the frequency of litter size. The aim of this study was to investigate the polymorphism of two fertility genes including FecB and FecG in Mughani, Afshari and Baluchi sheep in Khorasan Razavi province.Blood samples were taken from 95 Afshari, Baluchi and Mughani sheep. Two pairs of control (outer) and specific (inner) primers were used to amplify FecB and FecG gene fragments by the Tetra-ARMS PCR method. Temperature cycling of PCR amplification for FecB started at 94°C for 4 minutes, followed by 35 cycles consisting of 94°C for 25 seconds, annealing temperature at 54°C for 35 seconds, extension at 72°C for 20 seconds and a final extension at 72°C for 5 minutes. For amplification of the G1 point mutation on the FecG gene, the annealing temperature was 54°C for 35 s, extension was 70°C for 40 s, and final extension was 70°C for 5 minutes. The PCR products were electrophoresed on a 2% agarose gel.Three genotypes have been observed for the FecB gene in Afshari sheep; wild homozygous (++), heterozygous (B+) and homozygous mutant (BB). All Mughani and Baluchi sheep were homozygous for this gene. A 108 bp band was detected for mutant homozygotes. A band of 213 bp was observed in wild homozygotes. The frequency of wild homozygotes was high in the three breeds,. The frequency of the wild allele in this breed was 0.39 and that of the mutant allele 0.61, the overall frequencies for the three breeds being 0.8 and 0.2, respectively. The result of Tetra-ARMS-PCR for the G1 point mutation of the GDF9 gene showed polymorphism in all three breeds, however, the frequency of wild homozygotes was high. In the Balochi breed, only two animals (4%) were heterozygous and 96% of the animals showed the wild homozygous genotype. In the Mughani breed, 16% were heterozygous and only one animal was homozygous mutant. In addition, only one heterozygote was observed in the Afshari breed. Several studies have shown the association of the FecB, FecG and FecX genes with litter size in sheep. Due to the high frequency of wild homozygotes and the fact that Mughani and Baluchi ewes mostly gave birth to single lambs, the role of FecB mutation in litter size of Afshari ewes was observed. The ram used in this herd was heterozygous for FecB. In general, it can be concluded that the mutant FecB allele has a correlation with litter size in Iranian sheep. However, the statistical confirmation of this issue requires a dedicated study with a detailed record of reproductive traits.The results of this study demonstrated the presence of a Booroola mutation in the Afshari ewes that were offspring of heterozygous rams. In addition, all of these ewes had litter size in at least one of the two pregnancies. Hence, the Booroola mutation may potentially increase the litter size of ewes. However, a more comprehensive study measuring biological indicators such as sex hormone levels, ovulation rate and follicle size is needed to demonstrate the effect of these types of mutations on increasing fertility.

    Keywords: Candidate Gene, Fecundity, Polymorphism, Sheep
  • مسلم کریمی، فرهاد غفوری کسبی*، پویا زمانی
    مقدمه و هدف

    بررسی مقالات منتشر شده در حوزه انتخاب ژنومی نشان می دهد که در اکثر مطالعات انجام شده در گونه های دامی و زراعی ارزیابی ژنومی و پیش بینی ارزش های اصلاحی ژنومی بدون در نظر گرفتن اثرات ژنتیکی غالبیت انجام شده است. در صورتیکه مطالعاتی که اخیرا انجام شده، نشان می دهند که اثرات ژنتیکی غالبیت به نحو قابل توجهی در تنوع فنوتیپی صفات تولیدی دام های اهلی مشارکت دارند. از این رو به نظر می رسد چشم پوشی از اثرات ژنتیکی غالبیت صحت ارزیابی ژنومی را تحت تاثیر قرار می دهد. در این مطالعه پیامدهای در نظر نگرفتن اثرات ژنتیکی غالبیت در مدل ارزیابی ژنومی بر صحت، میانگین مربعات خطا، اریبی و قابلیت اعتماد ارزش های اصلاحی ژنومی بررسی شد.

    مواد و روش ها

    ژنومی شامل 5 کروموزوم، هر کدام به طول یک مورگان و حاوی 5000 نشانگر تک نوکلیوتیدی دو آللی (SNP) در سطح وراثت‎پذیری 0/5 شبیه سازی شد. به همه جایگاه های صفات کمی (QTLها) اثرات ژنتیکی افزایشی داده شد. توزیع های متفاوت اثرات QTL (یکنواخت، نرمال و گاما) و نیز سه سناریو از تعدادQTL  به صورت 5، 10 و 20% از تعداد کل SNPها (به ترتیب 250، 500 و 1000 QTL) به صورت فرضیه های شبیه سازی در نظر گرفته شد. در سناریوهای مختلف به صفر، 10، 25، 50 و 100% از QTLها اثرات غالبیت داده شد. ارزش های اصلاحی ژنومی با استفاده از روش بهترین پیش‎بینی نااریب خطی ژنومی (GBLUP) برآرود شده و شاخص های روش LR، شامل صحت پیش‎بینی، میانگین مربعات خطای پیش‎بینی، اریبی و قابلیت اعتماد ارزش های اصلاحی برای تجزیه و تحلیل ارزش های اصلاحی حاصل از GBLUP مورد استفاده قرار گرفتند.

    یافته ها

    نتایج نشان داد در صورتیکه اثرات ژنتیک غالبیت در تنوع فنوتیپی صفت مشارکت داشته باشند اما در مدل ارزیابی ژنومی لحاظ نشده و به صورت تفکیک نشده از اثرات ژنتیکی افزایشی باقی بمانند، منجر به کاهش صحت ارزش های اصلاحی ژنومی تا حدود 25% خواهد شد. همچنین میانگین مربعات خطای پیش بینی ارزش های اصلاحی ژنومی نیز با افزایش درصد QTLهای دارای اثر غالبیت (از 0/00 به 100%) تا 60% افزایش یافت. میزان اریبی ارزش های اصلاحی ژنومی نیز تحت تاثیر چشم پوشی از اثرات غالبیت قرار گرفت و با افزایش درصد QTLهای دارای اثر غالبیت (از 0/00 به 100%) تا 36% افزایش یافت. در ضمن قابلیت اعتماد ارزش های اصلاحی ژنومی نیز به طور چشمگیری با افزایش درصد QTLهای دارای اثر غالبیت (از 00/00 به 100%) تا حدود 40% کاهش یافت.

    نتیجه گیری

    به طورکلی نتایج این تحقیق نشان داد که عدم تفکیک اثرات ژنتیکی غالبیت از اثرات ژنتیکی افزایشی منجر به برآوردهای با صحت پایین، اریب و غیرقابل اعتماد از ارزش های اصلاحی ژنومی می شود که در نهایت بازدهی انتخاب ژنومی را کاهش می دهد. بنابراین پیشنهاد می شود که به منظور افزایش کارایی طرح های انتخاب ژنومی، اثرات غالبیت در مدل ارزیابی ژنومی منظور شود.

    کلید واژگان: اثرات ژنتیکی غالبیت، ارزیابی ژنومی، نشانگر تک نوکلئوتیدی دو آللی، GBLUP
    Moslem Karimi, Farhad Ghafouri-Kesbi*, Pouya Zamani
    Introduction and Objective

    The review of published articles in the field of genomic selection shows that in the most of studies conducted in livestock and crop species, genomic evaluation and prediction of genomic breeding values ​​have been done without considering the dominance genetic effects. However, recent studies have shown that the dominance genetic effects contribute significantly to the phenotypic variation of productive traits of domestic animals. Therefore, it seems that ignoring the dominance genetic effects will affect the accuracy of the genomic evaluation. In this article, the consequences of not considering the dominance genetic effects in the genomic evaluation model on accuracy, mean square error, bias and reliability of genomic breeding values ​​were investigated.

    Material and Methods

    A genome consisting of 5 chromosomes, each 1 Morgan length, containing 5000 bi-allelic single nucleotide polymorphism (SNP) was simulated at heritability level of 0.5. All quantitative trait loci (QTLs) were assigned additive genetic effects. Different distributions of QTL effects (uniform, normal and gamma) as well as three scenarios of the number of QTL as 5, 10 and 20% of the total number of SNPs (respectively 250, 500 and 1000 QTLs) were considered as simulation hypotheses. In different scenarios, dominance genetic effects were given to 0.00, 10, 25, 50 and 100% of QTLs. The genomic breeding values ​​were estimated using the genomic best linear unbiased prediction method (GBLUP) and the criteria of LR method such as prediction accuracy, mean square error of prediction, bias and reliability of the genomic breeding values ​​were used to analysis genomic breeding values ​​predicted by GBLUP.

    Results

    The results showed that if the dominance genetic effects contribute to the phenotypic variation of the interested trait, but ignored from the genomic evaluation model and remain unseparated from the additive genetic effects, lead to a decrease in the accuracy of the genomic breeding values ​​by about 25%. Also, the mean square error of prediction of genomic breeding values ​​increased by 60% following increase in the percentage of QTLs with dominance effect from 0.00 to 100%. The bias of genomic breeding values ​​was also affected by ignoring dominance effects and increased by 36% following increase in the percentage of QTLs with dominance effect from 0.00 to 100%. Also, the reliability of genomic breeding values ​​was significantly reduced by about 40% with the increase in the percentage of QTLs with dominance effect from 0.00 to 100%.

    Conclusion

    In general, the results of this research showed that not separating the dominance genetic effects from additive genetic effects leads to low-accuracy, biased, and unreliable estimates of genomic breeding values, which will ultimately reduce the efficiency of genomic selection schemes. Therefore, it was suggested that in order to increase the efficiency of genomic selection, dominance genetic effects should be included in the genomic evaluation model.

    Keywords: Dominance genetic effects, GBLUP, Genomic evaluation, Polymorphism, Single nucleotide
  • فاطمه رایجی یانسری*، سعید حسنی، مجتبی نجفی
    سابقه و هدف

    ژن میوستاتین به عنوان عامل مهارکننده رشد عضله اسکلتی شناخته شده و اگر جهش در ناحیه کدکننده آن اتفاق افتد، باعث تغییر نقش مهاری آن و افزایش عضله می‏گردد. این پژوهش با هدف شناسایی چندشکلی موجود در اگزون 3 ژن میوستاتین و بررسی صفات بیومتری وزن بدن و لاشه اندازه‏گیری شده با اولتراسونوگرافی در گوسفند کردی انجام شد.

    مواد و روش

    در این پژوهش برای اندازه گیری صفات ضخامت چربی پشت و مساحت ماهیچه چشمی از دستگاه اولتراسوند استفاده شد. خون گیری به طور تصادفی از تعداد 139 راس گوسفند کردی انجام و پس از استخراج DNA، قطعه 338 جفت بازی اگزون 3 ژن میوستاتین تکثیر شد. جهت تعیین ژنوتیپ‏ ژن میوستاتین، از تکنیک‏های PCR-RFLP ، PCR-SSCP و تعیین توالی مستقیم استفاده شد. بررسی اثرات ثابت جنس، نوع تولد و سال تولد بر صفات مورد مطالعه با رویه GLM نرم افزار SAS و مقایسه میانگین های حداقل مربعات سطوح اثرات ثابت با آزمون توکی- کرامر در سطح معنی داری 5 درصد انجام شد. برای بررسی ارتباط بین صفات از همبستگی پیرسون استفاده شد.

    یافته‏ ها: 

    در روش‏PCR-RFLP پس از هضم آنزیمی تمام نمونه‏ ها، تنها یک ژنوتیپ مشاهده شد و این جایگاه مونومورف (تک شکل) می‏باشد. نتایج به ‏دست آمده از روش PCR-SSCP، دو الگوی باندیA و B را نشان داد که شباهت زیادی بین دو الگوی مشاهده شده وجود داشت. لذا برای تعیین ژنوتیپ واقعی، برخی از نمونه ‏ها با الگوی متفاوت با روش توالی یابی مستقیم مورد ارزیابی قرار گرفتند که نتایج نشان داد که در بین نمونه ها چندشکلی وجود ندارد. میانگین ضخامت چربی پشت و مساحت عضله راسته اندازه‏گیری شده با اولتراسونوگرافی در این مطالعه به‏ ترتیب 46/0 سانتی‏متر و 78/7 سانتی‏متر مربع با میانگین وزن بدن 42/43 کیلوگرم بود. همبستگی بین دو صفت اولتراسوند (ضخامت چربی پشت و مساحت ماهیچه چشمی)، مثبت و 84/0 برآورد شد (01/0<p). کمترین ضریب همبستگی ضخامت چربی لاشه و مساحت ماهیچه چشمی با صفات مورد مطالعه به ‏ترتیب 02/0 و 3/0 مربوط به صفات وزن تولد و از شیرگیری بود و بیشترین ضریب همبستگی صفات مورد مطالعه با ضخامت چربی لاشه و مساحت ماهیچه چشمی به‏ ترتیب 82/0 و 87/0 مربوط به صفات وزن بدن در هنگام اولتراسونوگرافی و عرض دنبه میانی بود (001/0<p).

    نتیجه‏ گیری:

     در این پژوهش با استفاده از نشانگر ژنتیکی PCR-SSCP، PCR-RFLP و تعیین توالی مستقیم تنها یک ژنوتیپ در ژن میوستاتین تشخیص داده شد. با توجه به اینکه منابع مختلف، آلل جهش یافته ژن میوستاتین را به عنوان آلل موثر بر فنوتیپ عضله مضاعف و مطلوب جهت اصلاح نژاد و بهبود کیفیت و کمیت گوشت معرفی کرده اند، گله مورد بررسی فاقد این آلل بود. با توجه به تنوع نسبتا مناسب مشاهده شده در صفات مورد مطالعه بویژه صفات لاشه اندازه گیری شده با اولتراسوند، زمینه لازم برای اصلاح این صفات از طریق انتخاب وجود خواهد داشت.

    کلید واژگان: چندشکلی، ژن میوستاتین، PCR-RFLP، PCR-SSCP، گوسفند کردی
    Fatemeh Rayeji Yanesari *, Saeed Hassani, Mojtaba Najafi
    Background and Aim

    Myostatin gene is an inhibitor of skeletal muscle developmentmutations in its coding regionpromotesmuscle growth in some breeds, mutation of the myostatin gene has a significant effect on the increase of the body weight and carcass traits. This study was aimed to investigate the polymorphisms in exon 3 of the myostatin gene and evaluate investigation of body weights and carcass traits measured by ultrasound in Kurdi sheep.

    Materials and Methods

    In this study, back fat thickness and loin muscel area traits were measured by ultrasound instrument. Blood samples were collected randomly from 139 Kurdi sheep and following DNA extraction, a 388 bp fragment from exon 3 of myostatin gene was amplified. For genotyping of myostatin gene, PCR-SSCP, PCR-RFLP, and direct sequencing techniques were used. To determine the fixed effects of gender, birth type and birth year on the studied traits, GLM procdure of SAS software was used. Least square means comparison of different fixed effects subclasses was carried out by Tukey-Kramer test at 5% probability level. To measure the relationships between tarits, pearson correlation was used.

    Results

    In PCR-RFLP technique, after enzymatic digestion of all samples, only one genotype was observed and this locus was monomorphic. PCR-SSCP analysis showed two band patterns A and B, which were very similar in shape. Therefore, to determine the actual genotype, some samples with different band patterns were evaluated by direct sequencing technique. The results showed that there is no polymorphism among samples. The mean ultrasonic fat thickness and loin muscle area in this study were 0.46 cm and 7.78 cm2, respectively, with an average body weight of 43.42 kg at the time of ultrasonography. The correlation between the two ultrasound carcass traits (UBF and UMA) was positive (r=0.84, P<0.0001). The lowest correlation coefficient of carcass fat thickness and ocular muscle area with the studied traits were 0.02 and 0.3, for birth weight and weaning traits, respectively. The highest correlation coefficient of the studied traits with carcass fat thickness and loin muscle area were 0.82 and 0.87 for body weight at the time of ultrasonography and middle tail width, respectively (P=0.001).

    Conclusion

    In this study, using PCR-SSCP, PCR-RFLP and direct sequencing, only one genotype was detected in the myostatin gene. Considering that various studies have introduced the mutated allele of the myostatin gene as an effective allele on the double muscling for breeding and improving the quality and quantity of meat, the studied herd did not have the allele. Considering the relatively suitable diversity observed in the studied traits, especially the carcass traits measured by ultrasound, there will be a possiblity to improve the traits through selection.

    Keywords: Polymorphism, Myostatin Gene, PCR-RFLP, PCR- SSCP, Kurdi sheep
  • انتظار غزی، هدایت الله روشنفکر، خلیل میرزاده

    ارتباط بین رنگ اسب و برتری نژاد و خلوص نژادی، مطالعه چندشکلی ژن آگوتی را مورد توجه خاصی قرار داده است. ژن آگوتی (ASIP) نشانگر نحوه ی توزیع سیاهی در بدن است. هدف از این تحقیق، بررسی چند شکلی اگزون2 ژن آگوتی در جمعیت اسب اصیل عرب استان خوزستان می باشد. در این مطالعه خونگیری از 45 رآس اسب اصیل عرب برای تشخیص آلل های متفاوت ژن آگوتی استفاده شد که از شهرستان های شوش، دزفول، اهواز صورت گرفت. DNA از خون کامل به کمک روش استخراج نمکی انجام گرفت. واکنش زنجیره ای پلی مراز جهت تکثیر قطعه 101جفت بازی از اگزون2 ژن آگوتی با استفاده از پرایمرهای اختصاصی این ژن انجام شد. حذف 11جفت باز در اگزون 2 ژن ASIP (آگوتی سیگنالینگ پروتیین) مشاهده شد. که دلیل آن In/del (حذف و جهش) بودن ژن آگوتی است. در نهایت سه الگوی باندی AA ، Aa، aa با فراوانی 414/0 و 457/0 و127/0 مشاهده شد. فراوانی آللی A و a به ترتیب 644/0 و 356/0 است. نتایج نشان داد که این قطعه از ژن آگوتی چند شکل بوده و ژنوتیپ های AA، Aa، aa در جمعیت اثبات گردید. نتایج حاصل نشان داد که تعادل هاردی واینبرگ در جمعیت مورد مطالعه اسب های اصیل عرب وجود ندارد.

    کلید واژگان: چندشکلی، آگوتی، اسب
    Entezar Ghezzi, hadayat allehا roshanfekr, khalil mirzadeh

    Basic color in horses, such as black and white, brown and chestnut ASIP and MC1R gene is affected. The relationship between color horse and purity the study of gene polymorphism Aguti put special attention. The purpose of this study was to evaluate the polymorphism in exon 2 gene Aguti population of Arabic horse in Khuzestan. In this study, PCR-RFLP method for the detection of different alleles of the Aguti gene in horses used. Bleed extension of the 45 head of horses in the city of Ahvaz, Dezful and Shush were collected. Polymerase chain reaction 101 bp fragment of exon 2 gene and gene-specific primers were used Aguti. 11 bp deletion in exon 2 gene ASIP (Aguti signaling protein) occurred because of the In / del (delete and Insertion) of the gene Aguti. Finally three band pattern AA, Aa, aa abundance 0.414, 0.457, 0.127, respectively. The allele frequencies of A and a 0.644 and 0.356 respectively.The results showed that this fragment of gene polymorphism and genotype AA, Aa, aa population was established. The results showed that there is Hardy-Weinberg dis equilibrium in the studied population.

    Keywords: Polymorphism, Aguti, Arabic horse
  • علی فروهرمهر*، مجید خالداری
    وزن دنبه از جمله عوامل تاثیرگذار بر کیفیت لاشه در گوسفندان است. امروزه پژوهشگران در حوزه اصلاح نژاد دام تمرکز ویژه ای بر کم کردن وزن دنبه و افزایش بازارپسندی لاشه گوسفند دارند. در این مطالعه، با هدف بررسی وقوع چند شکلی در اگزون یک ژن BMP2 و ارتباط آن با صفت چربی دنبه، ابتدا از 150 راس میش نژاد لری بختیاری خون گیری شد و پس انجام فرایند استخراج DNA، اگزون یک ژن BMP2 توسط یک جفت آغازگر اختصاصی تکثیر شد. سپس با استفاده از تکنیک  PCR-SSCPچند شکلی در این جایگاه ردیابی و در نهایت، داده های به دست آمده توسط نرم افزارهای Popgene و SAS ارزیابی شدند. بر اساس نتایج به دست آمده، اگزون یک ژن BMP2 حاوی دو آلل A و B به ترتیب با توزیع 197 و 103 و فراوانی 7/65 درصد و 33/34 درصد بود که سه ژنوتیپ AA، AB و BB به ترتیب با توزیع 75، 47 و 28 درون جمعیت به ترتیب فراوانی های 50 درصد، 33/31 درصد و 67/18 درصد را به وجود آوردند. مقایسه میانگین وزن دنبه در هر یک از ژنوتیپ ها با استفاده از رویه دانکن نشان داد که اثر ژنوتیپ بر وزن دنبه در نژاد لری بختیاری در سطح احتمال پنج درصد معنی دار است. ژنوتیپ AA میانگین وزن دنبه 16/5، ژنوتیپ AB میانگین وزن دنبه 29/4 و ژنوتیپ BB میانگین وزن دنبه 76/3 را نشان دادند. نتایج این پژوهش نشان می دهد که می توان با استفاده از روش های تشخیص مولکولی و شناسایی گوسفندان حامل آلل های B و انتخاب آن ها به عنوان والدین نسل بعد می توان گله هایی با وزن دنبه کمتر و بازارپسندی بیشتر ایجاد نمود.وزن دنبه از جمله عوامل تاثیرگذار بر کیفیت لاشه در گوسفندان است. امروزه پژوهشگران در حوزه اصلاح نژاد دام تمرکز ویژه ای بر کم کردن وزن دنبه و افزایش بازارپسندی لاشه گوسفند دارند. در این مطالعه، با هدف بررسی وقوع چند شکلی در اگزون یک ژن BMP2 و ارتباط آن با صفت چربی دنبه، ابتدا از 150 راس میش نژاد لری بختیاری خون گیری شد و پس انجام فرایند استخراج DNA، اگزون یک ژن BMP2 توسط یک جفت آغازگر اختصاصی تکثیر شد. سپس با استفاده از تکنیک  PCR-SSCPچند شکلی در این جایگاه ردیابی و در نهایت، داده های به دست آمده توسط نرم افزارهای Popgene و SAS ارزیابی شدند. بر اساس نتایج به دست آمده، اگزون یک ژن BMP2 حاوی دو آلل A و B به ترتیب با توزیع 197 و 103 و فراوانی 7/65 درصد و 33/34 درصد بود که سه ژنوتیپ AA، AB و BB به ترتیب با توزیع 75، 47 و 28 درون جمعیت به ترتیب فراوانی های 50 درصد، 33/31 درصد و 67/18 درصد را به وجود آوردند. مقایسه میانگین وزن دنبه در هر یک از ژنوتیپ ها با استفاده از رویه دانکن نشان داد که اثر ژنوتیپ بر وزن دنبه در نژاد لری بختیاری در سطح احتمال پنج درصد معنی دار است. ژنوتیپ AA میانگین وزن دنبه 16/5، ژنوتیپ AB میانگین وزن دنبه 29/4 و ژنوتیپ BB میانگین وزن دنبه 76/3 را نشان دادند. نتایج این پژوهش نشان می دهد که می توان با استفاده از روش های تشخیص مولکولی و شناسایی گوسفندان حامل آلل های B و انتخاب آن ها به عنوان والدین نسل بعد می توان گله هایی با وزن دنبه کمتر و بازارپسندی بیشتر ایجاد نمود.
    کلید واژگان: چربی دنبه، چند شکلی، گوسفند لری بختیاری، BMP2، PCR-SSCP
    Ali Forouharmehr *, Majid Khaldari
    Introduction
    Having a fat tail is a characteristic of some Iranian native sheep breeds, whose main role is usually to store energy for using in limited food conditions. However, the amount of energy required to store fat in this tissue directly affects the efficiency of meat production and carcass quality. In Iran, the average weight of each carcass is about 15.3 kg, of which 15% is the fat tail. It requires 1.7 kg more feed per kilogram of fat tail than meat (protein), and customers pay a lower price per unit of weight for sheep with heavier fat tail. Today, researchers in the field of animal breeding have a special focus on reducing the weight of the fat tail and increasing the marketability of sheep carcasses. Bone morphogenetic protein 2 (BMP2) belongs to the β-metamorphic growth factor of the β family and plays an important role in bone and cartilage development and, therefore, seems to be the best candidate for the fat-tailed phenotype. Comparison of the results of genotype obtained from Ovine SNP50K Bead Chip in tow fat-tailed breeds with the results obtained in 13 thin tail breeds showed a missense mutation in BMP2 gene, with the frequency of different alleles in these two different groups.
    Materials and Methods
    In this study, in order to detect the polymorphism in BMP2 gene exon 1 and investigation of its relationship with tail fat trait, blood samples from 150 same age ewes of Lori Bakhtiari breed were randomly taken which are maintained in Gahar Dorud sheep breeding center (Dorud, Lorestan). DNA extraction was performed using a special DNA extraction kit (Pars Toos, Iran) according to the manufacturer's instructions. Determination of quality and quantity of extracted DNA was performed using agarose gel electrophoresis and nanodrop spectrophotometer, respectively. BMP2 gene exon 1 was amplified successfully by a pair of specific primer. The accuracy of this process was confirmed by 1.5% agarose gel. Then, using PCR-SSCP technique, 12% polyacrylamide gel and silver nitrate staining, probable polymorphisms were tracked in this position and finally calculation of Chi-square test (χ2) for deviation from Hardy-Weinberg equilibrium (HWE) has been assessed by Popgen (Ver. 1.32) software. The relationship between genotypes and average fat tail weight (Corrected by body weight (BW)) has been analyzed with the PROC GLM procedures in Statistical Analysis System (SAS) v. 9.1 version.
    Results and Discussion
    Based on the results, amplification of BMP2 gene exon 1 was successfully done and three different patterns of polymorphism have been detected through SSCP analysis.  Exon 1 of BMP2 gene in Lori Bakhtiari ewes containing A and B alleles with distributions of 197 and 103 and frequency of 65.7% and 34.33%, respectively, that have generated AA, AB and BB genotypes with distribution of 75, 47 and 28 and frequencies of 50%, 31.33% and 18.67%, respectively. Mean comparison of fat tail weight in each genotype using Duncan procedure showed that the effect of genotype on fat tail weight in Lori Bakhtiari breed was significant (P <0.05). AA genotype with average fat tail weight of 5.16 showed higher performance than AB genotype with average fat tail weight of 4.29 and BB genotype with average fat tail weight of 3.76. The results of statistical analysis also showed that the presence of allele A causes heavier fat tail weight and the presence of B allele causes lower fat tail weight (P <0.05). Heterozygosity and Homozygosity observed in this study are 0.3154 and 0.6846, respectively. The significance of the calculated chi-square genotypic frequency in each population at the level of 0.05 in comparison with the chi-square table shows that the studied populations are not in Hardy-Weinberg equilibrium. Which can be attributed to the pressure of selecting on reference population for genetic breeding for fat tail weight at Gahar Dorud sheep breeding center. Today, advances in genomic technologies have multiplied, and if information on loci associated with meat quality traits can be obtained and the genes that control these traits are located on chromosomal sites, they can be incorporated into breeding programs. Breeds should be used with MAS and cause genetic growth and development of these traits.
    Conclusion
    Using molecular detection methods and identifying sheep carrying B alleles and selecting them as the parents of the next generation, we can move towards producing herds with lower fat tail weight and more marketability.
    Keywords: BMP2, Fat tail, Lori Bakhtiari sheep, PCR-SSCP, Polymorphism
  • سعید چعب، محمدتقی بیگی نصیری، محمود نظری*، جمال فیاضی

    ژن Mx نقش مهمی در پاسخ های ضد ویروسی مرغ دارد. ژن Mx یک کاندید بالقوه به عنوان یک نشانگر ژنتیکی مقاوم به ویروس آنفولانزا در مرغ می باشد. پژوهش حاضر به منظور بررسی چندشکلی ژن مقاومت به میکسوویروس (Mx) با استفاده از روش PCR-RFLP در مرغ بومی خوزستان انجام گرفت. به طور تصادفی از 100 قطعه مرغ بومی خوزستان از شهرهای (ملاثانی، اندیمشک، شوش) خون گیری شد و استخراج DNA از نمونه ‏ها انجام شد. واکنش زنجیره‏ای پلیمراز (PCR) برای تکثیر قطعه 299 جفت بازی ژن مقاومت به میگزو ویروس (Mx) به کمک آغازگرهای اختصاصی صورت گرفت. قطعه تکثیر شده به‏ وسیله آنزیم برشی HPY8l هضم گردید. فراوانی‏ آلل‏هایA  و G در مرغان بومی شوش به ترتیب  54/0 و 46/0 ، در ملاثانی 85/0 و 15/0و در اندیمشک 57/0 و 47/0 و فراوانی ژنوتیپ‏های AA، GG و AG به ترتیب در شوش 40/0، 33/0 و 27/0، در ملاثانی 8/0، 1/0 و 1/0 و در اندیمشک 45/0، 40/0 و 15/0 بود. نتایج نشان داد که فراوانی آلل A بیشتر از G است بعلاوه، هتروزیگوسیتی مشاهده شده و تعداد آلل موثر نشان داد که میزان تنوع این جایگاه ها در جمعیت پایین است. با استفاده از آزمون کای مربع (X2) مشخص شد که فراوانی آلل‏ها در این جایگاه ژنی در حالت تعادل هاردی - وینبرگ نمی‏باشد. نتایج این تحقیق پیشنهاد می داد که ژن MX دارای چندشکلی است و پتانسیل بالایی برای استفاده به عنوان نشانگر ژنتیکی برای مقاومت در برابر آنفولانزای مرغی و بیماری نیوکاسل دارد.

    کلید واژگان: ژن مقاومت به میکسوویروس (MX)، آنفولانزا، مرغ بومی و چندشکلی
    Saeed Chaab, MohamadTaghi Beigi Nassiri, Mahmood Nazari *, Jamal Fayazi

    The myxovirus (Mx) gene play a crucial role in the antiviral responses of chicken. The Mx gene is a potential candidate as a genetic resistance marker to the avian influenza virus in chickens. This study was conducted to determine the polymorphism of myxovirus gene polymorphism using PCR-RFLP method in Khuzestan native chicken. In this research, blood samples were collected randomly from 100 Khuzestan native chicken (Malasani, Andimeshk and Shush) and DNA were extracted. Polymerase chain reaction (PCR) was used to amplify 299bp fragments of myxovirus (Mx) gene by specific primers. Then, the amplified fragment was digested with HPY8l enzyme. Allele frequency for A and G, in Shoosh 0.54 and 0.46, Mollasani 0.85 and 0.15 and Andimeshk 0.57 and 0.47 and genotype frequencies of AA, GG and AG, in Shoosh 0.40, 0.33 and 0.27, Mollasani 0.8, 0.1 and 0.1 and Andimeshk 0.45, 0.40 and 0.15 were achieved, respectively. The results showed that the frequency of allele A was higher than G. Furthermore, the observed heterozygosity and the effective number of alleles demonstrated low diversity in the population. Chi-square (X2) analysis showed that the locus allele frequencies are not in Hardy-Weinberg equilibrium. The results of this study suggested that the MX gene had polymorphism and had a high potential for use as a genetic marker for resistance to avian influenza and Newcastle disease.

    Keywords: Mx gene, Native chicken, Avian Influenza, Polymorphism
  • مهرانگیز فتحی، علی هاشمی*، قربان الیاسی، نوشین قهرمانی
    مقدمه و هدف

    بوقلمون به دلیل خصوصیاتی از قبیل میزان وزن گیری و سرعت رشد زیاد، ظریب تبدیل غذایی پایین و تولید تخم و گوشت بیشتر، به منظور رفع بخشی از نیازهای منابع غذایی در سراسر جهان حایز اهمیت است. ژن MC4R به عنوان یک ژن کاندید در هومیوستازی انرژی و تنظیم وزن بدن در گونه های مختلف شناخته شده است. شناسایی جنبه های ژنتیکی و ژن های عمده تاثیر گذار بر روی توازن انرژی، تولید، باروری و ایمنی از علاقه مندی های اخیر محققان ژنتیک و اصلاح نژاد می باشد. این پژوهش به منظور بررسی چندشکلی موجود در ژن MC4R با استفاده از تکنیک PCR-SSCP و ارتباط آن با صفات عملکردی تخم در بوقلمون انجام شد.

    مواد و روش ها: 

    در این مطالعه به منظور بررسی چندشکلی ژن MC4R از 100 بوقلمون تخم گذار به صورت تصادفی خون گیری به عمل آمد. DNA ژنومی با کیفیت مطلوب از نمونه های خون با استفاده از دستورالعمل بوم و همکاران استخراج شد. واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR) جهت تکثیر قطعه 469 جفت بازی از ژن MC4R انجام شد گرفت. از روش تفاوت فرم فضایی رشته های منفرد (SSCP) جهت تعیین الگوهای ژنوتیپی نمونه ها استفاده شد. تجزیه و تحلیل آماری ارتباط بین صفات عملکردی تخم و الگوهای ژنوتیپی با استفاده از رویه GLM نرم افزار SPSS انجام گرفت.

    یافته ها: 

    نتایج SSCP محصولات PCR با استفاده از ژل پلی آکریلآمید و نیترات نقره نشان داد که جایگاه ژنی MC4R چندشکل بوده و چهار الگوی ژنوتیپی مختلف AB،AC ،BC و CC به ترتیب با فراوانی های 52/1، 4/31، 22/93 و 20/84 درصد حاصل شد. ژنوتیپ AB وAC  به ترتیب بیشترین و کمترین فراوانی ژنوتیپی را دارا بودند.

    نتیجه گیری

    نتایج ارایه شده در این تحقیق نشان داد که بین الگوهای ژنوتیپی و عملکرد تخم شامل توده، وزن متوسط و تعداد تخم از لحاظ آماری هیچ ارتباط معنی داری وجود ندارد. با توجه به اهمیت ژنMC4R ، مطالعه این جایگاه ژنی در جمعیت هایی با اندازه بزرگ تر پیشنهاد می شود.

    کلید واژگان: بوقلمون، چندشکلی، ژن MC4R، عملکرد تخم، PCR-SSCP
    Mehrangiz Fathi, Ali Hashemi*, Ghorban Elyasi, Nooshin Ghahramani
    Introduction and Objective

    turkey is important all over the world in order to improve some of food supply required for several reasons such as its weight gain and high growth rate, low feed conversion ratio, and production of more eggs and meat. The MC4R gene is one of the most important candidate genes in different species which can affect the energy homeostasis and body weight regulation. Identity the genetic aspects and major gene influence on energy balance, production, fertility, safety are the recent interests of genetic and breeding researchers. The objective of this study was undertaken to identify polymorphisms of the MC4R gene using PCR single-strand conformational polymorphism (PCR–SSCP) analysis and to evaluate association of these polymorphisms with egg performance in turkey.

    Material and Methods

    For doing this research in order to investigate polymorphism of MC4R, 100 laying turkeys, randomly selected then all animals were blooded. Genomic DNA with optimal quality was extracted from blood samples using the protocol of Boom et al. PCR was done for amplifying a fragment in size of 469 bp of MC4R gene. The single strand conformation polymorphism technique (SSCP) was used to determine genotype. A statistical model was done by using GLM of SPSS software to find the association between the SSCP genotype patterns of PCR products with egg performance in turkey.

    Results

    The results of PCR-SSCP by using polyacrylamide gel and silver nitrate showed that this population was polymorphic at the studied loci and four different genotypes AB, AC, BC and CC, with frequencies of 52.1%, 4.13%, 22.93% and 20.48% respectively were observed. Genotype AB and genotype AC has the highest and lowest genotypic frequencies, respectively.

    Conclusion

    The results indicated that the MC4R gene is polymorph and there was no significant difference between the genotype patterns and egg performance (egg mass, mean egg weight, and the number of eggs). Due to the importance of the MC4R gene, the study of this gene locus suggested in larger populations.

    Keywords: MC4R gene, Performance Egg, PCR-SSCP, Polymorphism, Turkey
  • محمد یحیایی*، مهدی خدایی، محمدحسین مرادی
     سابقه و هدف

    هورمون لوتیینه کننده (LH) از جمله هورمون های مهم تولیدمثلی است که از لب پیشین هیپوفیز ترشح می شود و نقش کلیدی در تنظیم چرخه فحلی، بلوغ فولیکول های تخمدانی، تخمک ریزی، تشکیل جسم زرد، توسعه جسم زرد و نگهداری آن دارد. انتقال پیام LH از طریق اتصال آن به گیرنده های برون سلولی صورت می گیرد به طوریکه LH بعد از اتصال به گیرنده خود (LHR) از طریق فعال سازی پیامبر ثانویه cAMP منجر به فعال شدن زنجیره آبشاری درون سلولی و در نهایت بیان پروتیین ها و آنزیم های مخصوص می گردد. لذا برهمکنش هورمون لوتیینه کننده (LH) با گیرنده اختصاصی خود (LHR) یک از گام های کلیدی در مسیر بلوغ فولیکولی و تخمک گذاری آن ها است. چندشکلی و ایزوفروم های مختلف LHR از جمله تغییرات ژنتیکی می باشند که می توانند بر روی عملکرد LH و متعاقبا بازدهی تولیدمثلی تاثیر گذار باشند. هدف از انجام مطالعه حاضر مقایسه چندشکلی های مختلف LHR از نظر ساختار سوم پروتیینی و تمایل برهمکنش آن ها با LH در 'گاو شیری بود.

    مواد و روش ها

    به منظور انجام مطالعه توالی های آمینواسیدی LHR از Genebank گرفته شد. در ابتدا چندشکلی ها با آنالیز هم ترازی شناسایی شدند. ساختارهای سوم مربوط به آنها با روش همولوژی مدلینگ و با استفاده از نرم افزار Modeller وپیش بینی گردید. ساختارهای ایجاد شده با استفاده از نرم افزار گرافیکی PyMol 2.5.1 و نمودار Ramachandran مورد مشاهده و ارزیابی قرار گرفتند. همچنین شاخص های مختلف فیزیکی-شیمیایی پروتیین های مدل شده مانند نقطه ایزوالکتریک، وزن مولکولی، تعداد دنباله های منفی و مثبت و مقدار Grand Average of hydropathicity (GRAVY) با استفاده از ابزار ProtParam در پایگاه Expasy محاسبه گردید. در ادامه میزان تمایل LH به هر کدام از چندشکلی های LHR با استفاده از تکنیک داکینگ مولکولی و بر پایه دو شاخص موقعیت فضایی و انرژی اتصال مورد ارزیابی قرار گرفت.

    یافته ها

    براساس نتایج بدست آمده تنها دو چندشکلی (LHR1 و LHR2) در میان توالی های مورد مطالعه شناسایی شد. مدل های ایجاد شده برای دو چندشکلی یافت شده از کیفیت مناسبی برخوردار بودند و تفاوتی در شاخص های ساختاری و فیزیکوشیمیایی بین آن ها مشاهده نشد. نتایج داکینگ نشان داد علی رغم تفاوت انرژی اتصال کل در دو چندشکلی، این تفاوت را نمی توان به جایگزینی آمینواسیدی ارتباط داد و احتمالا این اختلاف مرتبط با تفاوت جزیی در جهت گیری LH نسبت به چندشکلی های LHR1 و LHR2 می باشد. بخش زیادی از آمینواسیدهای درگیر در پیوند هیدروژنی در هر دو کمپلکس LH-LHR1 و LH-LHR2 مشابه بودند.

    نتیجه گیری

    به طور کلی نتایج حاصل از این مطالعه می تواند نقش موثری در درک رابطه چندشکلی و فعالیت فیزیولوژیک داشته باشد.

    کلید واژگان: اسیدآمینه، چندشکلی، داکینگ مولکولی، گیرنده هورمون لوتئینه کننده، گاوشیری
    Mohammad Yahyaei *, Mahdi Khodaei Motlagh, MohammadHossein Moradi
    Background and objectives

    Luteinizing hormone (LH) is one of the most important reproductive hormones that is secreted by the anterior pituitary gland and plays a key role in regulating the estrous cycle, maturation of ovarian follicles, ovulation, corpus luteum formation, corpus luteum development and maintenance. The LH message is transmitted through by binding it to its extracellular receptors, so that after binding to its own receptor (LHR), LH activates the intracellular cascade chain by activating the secondary messenger cAMP, and ultimately the expression of specific proteins and enzymes. Therefore, the interaction of luteinizing hormone (LH) with its specific receptor (LHR) is one of the key steps in the path of follicular maturation and ovulation. Polymorphisms and LHR splicing are among the genetic changes that can affect LH function and consequent reproductive efficiency.The aim of this study was to compare the tertiary structure of different LHR polymorphisms and their binding affinity to LH in dairy cows.

    Materials and methods

    For this purpose, LHR amino acid sequences were obtained from Gene bank. Firstly, Polymorphisms were identified by alignment analysis. Their related third structures were predicted by homology modeling technique using Modeller software. The created structures were observed and evaluated using PyMol 2.5.1 graphics software and Ramachandran plot. Also, different physico-chemical parameters of the modeled proteins such as isoelectric point, molecular weight, and number of negative and positive sequences and Grand Average of hydropathicity (GRAVY) were calculated using ProtParam tool in Expasy database. Then, the affinity of LH to each of the LHR polymorphism was evaluated using molecular docking technique based on binding energy and spatial position indices.

    Results

    Based on the results, only two polymorphisms (LHR1 and LHR2) were identified among the studied sequences. The predicted models for the two polymorphisms have a good quality and there was no difference in structural and physicochemical parameters between them. Docking results showed that, despite the difference in total binding energy between the two polymorphisms, this difference could not be attributed to amino acid substitution and this difference is probably related to an orientation of the LH relative to the LHR1 and LHR2. Most of the amino acids that were involved in hydrogen bonding were similar in both the LH-LHR1 and LH-LHR2 complexes.

    Conclusion

    In general, the results of this study can be used to the relationship between LHR polymorphism and its physiological activity.

    Keywords: Amino acid, Dairy cow, LHR, Molecular docking, Polymorphism
  • Zahra Mokhtari, Ahmad Ahmadi *, Pouya Zamani, Reza Talebi, MohammadReza Ghafari

    Follicle-stimulating hormone (FSH) is necessary for the hypothalamic-pituitary-gonadal axis, and plays an important role in reproduction by binding to a specific receptor (FSHR) through β-subunit of FSH in the surface of the ovarian granulosa cells. This study aimed to characterize FSH β-subunit gene (FSHβ) polymorphism and its association with litter size (LS) using a sample of 118 Mehraban sheep. Polymerase chain reaction (PCR) was performed to amplify two fragments of 300 bp and 431 bp of the ovine FSHβ gene (Oar_v4.0; Chr 15, NC_019472.2). Polymorphisms in the studied fragments were then explored using single strand conformational polymorphism (SSCP) and DNA sequencing methods. A total of seven single-nucleotide polymorphisms (SNPs), including g.59078564 C>G, g.59078624 T>C, g.59078655 T>C, g.59078691 T>C, g.59078754 C>A, g.59080186 G>C and g.59080365 C>T, were found among the six detected SSCP patterns A to F. Moreover, two novel indel polymorphisms called e.g., g.59078702del8-bp−ins64-bp and g.59078726ins54-bp were identified among the three different SSCP genotypes patterns G to I. We found significant differences on prolificacy categories between SSCP genotypes patterns D, E and F (P < 0.01) that simultaneously represented SNP polymorphisms of g.59078754 C>A, g.59080186 G>C and g.59080365 C>T. Similarly, novel indel polymorphisms revealed a significant difference on prolificacy categories between SSCP genotypes patterns G, H and I (P < 0.05). Our results suggest that the FSHβ is a strong candidate gene to associate with the LS in sheep.

    Keywords: FSHβ gene, litter size, Mehraban sheep, polymorphism
  • فاطمه یوسفی، عبدالله میرزایی*، حسن شریفی یزدی، ابوالفضل حاجی بمانی شورکی
    مقدمه و هدف

    در صنعت پرورش گاو شیری همزمان با انتخاب گاوهای پرتولید، اهمیت شناسایی ژنوتیپ مقاوم به بیماری ها از جمله ورم پستان نیز تاکید شده است. پلی مورفیسم ژن بتادیفنسین گاو می تواند به عنوان یکی از نشانگرهای مولکولی در انتخاب گاوهای شیری مقاوم به ورم پستان مورد استفاده قرار گیرد. هدف از این مطالعه، بررسی ارتباط موتاسیون نقطه ای ژن بتا-دیفنسین و وقوع ورم پستان بالینی در گاوهای شیری با استفاده از روش RFLP-PCR در جهت شناسایی ژنوتیپ مطلوب ژن بتادیفنسین گاو شیری مقاوم به ورم پستان بود.

    مواد و روش ها: 

     از مجموع 73 گاو ماده (32 راس دارای سابقه بیماری ورم پستان و 41 راس فاقد سابقه) در یک گاوداری صنعتی نمونه خون در لوله های حاوی ضد انعقاد EDTA اخذ شد. پس از استخراج DNA، و تکثیر ناحیه دارای پلی مورفیسم ژن بتادیفنسین گاو (393 جفت باز)، جهت تشخیص سریع پلی مورفیسم در ناحیه 2239 توالی ژن (تبدیل باز C به T)، محصولات PCR، توسط آنزیم اندونوکلیاز (NlaIII (Hin1II)) هضم آنزیمی شد. بررسی آماری نتایج مطالعه به وسیله آزمون مربع کای (Chi-square) انجام گرفت.

    یافته ها: 

    فراوانی آلل های مربوط به ژن بتادیفنسین درمورد آلل C و آلل T در جمعیت گاوهای مورد مطالعه به ترتیب 0/68 و 0/32 بود. نتایج این مطالعه بیان گر ارتباط بین موارد ابتلا به بیماری ورم پستان و وجود پلی مورفیسم در ژن بتادیفنسین بود. بطوریکه، موارد ابتلا به بیماری ورم پستان در گاوهای دارای آلل T نسبت به گاوهای فاقد آن  از نظر عددی کمتر بود.

    نتیجه گیری: 

    برخی از پلی مورفیسم های ژن بتادیفنسین، می تواند در برنامه های تولید مثلی به عنوان نشانگر مولکولی جهت انتخاب گاوهای شیری به منظور کاهش تعداد موارد ابتلا به بیماری ورم پستان بالینی مورد استفاده قرار گیرد.

    کلید واژگان: بتادیفنسین، پلی مورفیسم، گاو شیری، ورم پستان
    Fateme Yousefi, Abdolah Mirzaei*, Hassan Sharifiyazdi, Abolfazl Hajibemani
    Introduction and Objective

    In the dairy industry, it is important to identify the genotypes resistant to mastitis while select high-yielding dairy cows. Bovine β-difensin gene polymorphism can be used as a molecular marker in the selection of mastitis-resistant dairy cows. The aim of this study was to investigate the relationship between point mutation of β4-difensin gene and the occurrence of clinical mastitis in the dairy cows using RFLP-PCR method and identification of superior genotype of dairy cows β-difensin gene for mastitis resistance.

    Material and Methods

    blood sample (with EDTA anticoagulant) was taken from total 73 cows (32 with a history of mastitis and 41 with no history of mastitis) in an industrial dairy farm. After DNA extraction amplification of the region of bovine β-difensin gene (393 bp) was performed. PCR products were digested by endonuclease (NlaIII (Hin1II)) for rapid detection of polymorphism in the 2239 region of the β-difensin gene (C to T conversion). Statistical analysis was performed by Chi-square test.

    Results

    Allele frequencies were 0.68 and 0.32 for C and T, respectively. Statistical analysis was performed by Chi-square test. The results of this study indicate the association between number of mastitis and polymorphism in the β-difensin gene. In other words, the incidence of mastitis was  numerically lower in cows with T allele than in cows without it (p=0.07).

    Conclusion

    It can be concluded that the bovine β-difensin gene can also be used as a molecular marker in the selection of dairy cows to reduce the incidence of mastitis.

    Keywords: β-difensin, Dairy cow, Mastitis, Polymorphism
  • علی هاشمی*، نوشین قهرمانی، مختار غفاری، قربان الیاسی
    مقدمه

    بلدرچین به دلیل خصوصیاتی از قبیل کوچک بودن اندازه بدن، فاصله نسلی کوتاه، میزان رشد بالا و تولید تخم و گوشت بیشتر به طور گسترده در مطالعات آزمایشگاهی استفاده می شود. IGF-I به عنوان یک ژن کاندید مرتبط با صفات وزن بدن و رشد در گونه های مختلف حایز اهمیت است. این آزمایش به منظور بررسی چندشکلی ژن IGF-I و ارتباط آن با صفت وزن بدن در بلدرچین ژاپنی انجام گرفت.

    مواد و روش

    در مطالعه حاضر رکوردهای مربوط به وزن بدن 110 قطعه بلدرچین ژاپنی در دوره های پرورشی مختلف ثبت و DNA ژنومی با کیفیت مطلوب از نمونه های خون با استفاده از پروتکل پروناز استخراج شد. واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR) جهت تکثیر قطعه 465 جفت بازی از ژن IGF-I استفاده شد. روش تفاوت فرم فضایی رشته های منفرد (SSCP) جهت تعیین الگوهای ژنوتیپی نمونه ها بکار گرفته شد. تجزیه و تحلیل آماری ارتباط بین صفت وزن بدن و الگوهای ژنوتیپی با استفاده از رویه GLM نرم افزار SAS انجام گرفت.

    نتایج و بحث

    نتایج SSCP نشان داد جایگاه ژنی اگزون 4 چندشکل بوده و سه الگوی ژنوتیپی با فراوانی های 7/27 ، 91/50 و 82/41 درصد بدست آمد. نتایج ارایه شده در این تحقیق نشان داد که بین الگوهای ژنوتیپی و وزن بدن در سن 30 روزگی از لحاظ آماری تفاوت معنی داری وجود داشت. در ارتباط با تاثیر جنس با وزن بدن نیز در سن 60 روزگی اختلاف معنی داری برقرار بود.

    نتیجه نهایی

    با توجه به این پژوهش جایگاه منتخب برای بررسی ژن IGF-I در بلدرچین می تواند به عنوان یک جایگاه پیشنهادی موثر بر صفت وزن بدن به شمار آید. همچنین می تواند به عنوان یکی از عواملی باشد که باعث تفاوت وزن بدن در دوره های مختلف می شود.

    کلید واژگان: وزن بدن، ژن IGF-I، بلدرچین ژاپنی، چندشکلی
    Nooshin Ghahramani, Mokhtar Ghaffari, Ghorban Elyasi Zarrin Ghobaie
    Introduction

    In order to take advantage of breeding programs and productivity of poultry and other domesticated animals, it is essential to assess genetic variability and study the strategies to preserve genetic diversity. The Japanese quail is widely used as a model for animal research purposes in laboratory studies because of its small body size, short intergeneration interval, high growth rate, production of more eggs and meat. Although, Japanese quail has various benefits as a laboratory bird, but its genome sequence is not accessible now. The genome sequence of Japanese quail will deliver important genomic resources to accelerate different studies and to authenticate divergent lines of Japanese quail. Growth is a complex physiological pathway that occurs from fertilization until maturity in birds. Insulin-like growth factor I (IGF-I) gene is one of the most important candidate genes in different species which can affect the performance traits because of its function in metabolism and growth. IGF-I is a 70 amino acid polypeptide hormone with endocrine, paracrine, and autocrine effects. It has been reported that there is association of genetic polymorphisms of the IGF-I gene with growth traits in the poultry. There are relatively few reported studies about the relation between genetic markers of the IGF-I gene and body weights in quails. The objective of this study was undertaken to identify polymorphisms of the IGF-I gene using PCR single-strand conformational polymorphism (PCR–SSCP) analysis and to evaluate association of these polymorphisms with body weight in the Japanese quail.

    Materials and methods

    For doing this research, body weight of the 110 quails under study (46 males and 64 females) in different ages were collected. All data were collected from the Natural Resources Research Center of East Azerbaijan. The data included the identification of the animal, year of birth, sex, body weights at 15, 30, 45 and 60 days. Genomic DNA was extracted from 10 μl of blood in presence of Pronase (Bailes et al., 2007) and stored in EDTA-coated tubes and placed immediately inside an ice box and transferred to the laboratory. The samples were stored at -20 until DNA has been extracted. The quality and quantity of extracted DNA were measured by %0/8 agarose gel electrophoresis. PCR was done for amplifying a fragment in size of 465 bp of IGF-I gene. The PCR primers for the IGF1 gene were designed based on GenBank. PCR primers of IGF-I gene was mentioned in Table 1. The PCRs were carried out in 25 μl volumes containing 1 unit Taq DNA Polymerase, reaction buffer 1X (Sina Gene, Tehran, Iran), 1/5 mM MgCl2, 0/2 μM each of dNTPs, 10 μM of each primer (Sina Gene, Tehran, Iran) and 30 ng of genomic extracted DNA as template. PCR was performed using the T-professional thermal cycler. The thermal profile consisted of 3 min at 95°C, followed by 35 cycles of 40 s at 95°C, 30 s at 58°C and 40 s at 72°C, with a final extension of 5 min at 72°C. Amplification was carried out in Mastercycler (Bailes et al.,2007). PCR products were detected by electrophoresis on %1/5 agarose gel containing ethidium bromide and were visualized in a gel documentation system with a UV transilluminator. PCR products were mixed with 20 μl of denaturing loading dye [95% deionized formamide, %0/35 xylene cyanol, %0/25 bromophenol blue and 10 mM EDTA] in a total volume of 10 μl. The mixture was denatured at 95°C for 15 min and was snap chilled on ice. The electrophoresis was performed in 0.5X TBE buffer (Tris 100 mM, boric acid 9 mM, EDTA 1 mM) at room temperature (18°C) and constant 110 V for 16 h. Polyacrylamide gels were stained with silver according to the protocol described (Benbouza et al.,2006). A statistical model included the mean of population, fixed effect of the sex, random effect of the genotype patterns and residual random term was done by using GLM of SAS software to find the association between the SSCP genotype patterns of PCR products with the body weights. Significant differences among means of different genotypes were calculated using Duncan method in the GLM program and P values of 0.05 were considered statistically significant.

    Results and discussion

    The investigation of candidate genes is one of the foremost techniques to reveal whether definite genes are associated with the economic traits in animals. We successfully amplified the exon 4 of the IGF-I gene. All extracted DNAs from quail blood samples yielded a specific single band PCR product without any nonspecific band. Therefore, the PCR products were directly used for SSCP analysis. The results of SSCP showed that this population was polymorphic at the studied loci and three different genotypes with frequencies of 7.27%, 50.91% and 41.82%, respectively were observed in the examined quails (Figure 3). The results indicated that the exon-4 of IGF-1 gene is polymorph and there was a significant difference (P<0.05) between the genotype patterns and body weight on 30 days. However, for association of gender effect on body weight, there was a significant difference (P<0.05) in the age of 60 days. Also the average daily gain in females is more than males in different ages.

    Conclusion

    The goal of this study was to determine genetic polymorphism of IGF-I gene in Japanese quail. According to this research, the selected locus for investigating of IGF-I gene in quail can be considered as a locus that effects on body weight and growth rate of quails. It can be also measured as the factor that cause of difference of body weight in different periods.

    Keywords: body weight, Insulin-Like Growth Factor-I, Japanese quail, Polymorphism
  • حامد شریفی نژاد*، محمدباقر منتظر تربتی

    در این تحقیق به منظور شناسایی چند شکلی های قسمتی از ژن فاکتور موثر بر رشد بتا-3 (TGFβ3) در جوجه های گوشتی سویه راس با استفاده از تکنیک واکنش های زنجیره ای پلیمراز و روش آرایش فرم فضایی رشته های منفرد (PCR-SSCP) انجام شد. به این منظور بطور تصادفی از تعداد 200 قطعه جوجه خون گیری به عمل آمد، و سپس DNA ژنومی آنها استخراج گردید. برای تعیین کیفیت DNA های استخراجی از ژل آگارز 1%  استفاده شد. سپس با استفاده از یک جفت پرایمر اختصاصی طی واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) قطعه ای از ژن به اندازه 294 جفت باز از ناحیه قسمتی از اینترون چهار و کل اگزون پنجم این ژن تکثیر گردید، و در نهایت برای مشخص شدن باندها از ژل آکریلامید و رنگ آمیزی به روش نیترات نقره استفاده شد. تجزیه و تحلیل الگوهای باندی منجر به شناسایی سه الگو باندی AA، AB و BB شد، که فراوانی آنها به ترتیب برابر با 52/0، 42/0 و 06/0 بدست آمد. و دو آلل A و B با فراوانی 73/0 و 27/0 در جمعیت مورد مطالعه شناسایی شد. شاخص شانون و تعداد آلل موثر برای این جایگاه از ژن TGFβ3 به ترتیب 5833/0 و 6507/1 بدست آمد. برای تایید نتایج حاصل از PCR-SSCP برخی نمونه ها از هر ژنوتیپ تعیین توالی مستقیم شدند. مقایسه میانگین حداقل مربعات ژنوتیپ های مختلف نشان داد که چندشکلی ژن TGFβ3  با صفات درصد وزن ران و درصد وزن لاشه ارتباط معنی داری دارد.

    کلید واژگان: جوجه گوشتی، چند شکلی، ژن TGFβ3، رشد و SSCP
    Hamed Sharifi *, Mohammad Bgher Montazer Torbati

    In this research in order to identify the part of the gene polymorphism transforming growth factor beta-3 (TGFβ3) in broiler chickens Ross, polymerase chain reaction technique and single-strand conformation polymorphism (PCR-SSCP) were performed. For this purpose randomly selection was done between 200 chicks and selected chicks were bled, and genomic DNA was extracted. To determine the quality of the DNA extracted 1% agarose gel was used. Then, by using a pair of specific primers through polymerase chain reaction (PCR) gene fragment with the size of 294 bp from parts of fourth introns and entire fifth exons of the gene was amplified, and finally to determine the bands acrylamide gel and stained with silver nitrate were used. The analysis of band patterns lead to identify three band patterns AA, AB and BB, with 0.52, 0.42 and 0.06 frequency, respectively. Two alleles A and B, with a frequency of 0.73 and 0.27 in the study population was also identified. Shannon index and effective number of alleles for the TGFβ3 gene were 0.5833 and 1.6507, respectively. To confirm the results of PCR-SSCP some samples of each genotype were sequenced directly. Compare of least squares mean different genotypes showed that the gene polymorphism TGFβ3 has significant relation with leg weight and carcass traits.

    Keywords: broiler, PCR, Polymorphism, SSCP, TGFβ3 gene
  • حسن چنانی، محمود نظری*، محمدتقی بیگی نصیری، هدایت الله روشنفکر، علی آقایی

    ژن DMB2 یکی از ژن های خوشه MHC است که در پاسخ ایمنی همورال نقش ایفا می کند. این تحقیق جهت شناسایی چندشکلی ناحیه اگزون 2 ژن MHC-DMB2 و ارتباط آن با پاسخ ایمنی همورال در بلدرچین ژاپنی انجام گرفت. بدین منظور در روز 28 دوره پرورش، مقدار 2/0 میلی لیتر محلول پنج درصد گلبول قرمز خون گوسفندی (SRBC) به عضله سینه 130 بلدرچین ژاپنی (65 نر و 65 ماده) تزریق شد و هفت روز بعد در روز 35 دوره پرورش، خون گیری جهت تعیین تیتر آنتی بادی علیه SRBC  انجام شد. DNA ژنومی از نمونه‏های خون استخراج شد و قطعه‏ای به اندازه 333 جفت باز از این جایگاه با استفاده از واکنش زنجیره‏ای پلی‏مراز (PCR) تکثیر شده و محصولات PCR به وسیله آنزیم برشی Hinf I هضم شدند. نتایج حاصل حاکی از وجود دو نوع آلل C (333 جفت بازی) و آلل G (226 و 107 جفت بازی) در این جایگاه بود که فراوانی آن‏ها در کل جمعیت به ترتیب 6/74 و 4/25 درصد محاسبه شد.‏‏ نتایج نشان دهنده‏ وجود چندشکلی و میزان هموزیگوسیتی بالا در جمعیت مورد مطالعه است. به علاوه، نتایج نشان داد که ژنوتیپ اثر معنی داری بر تیتر آنتی بادی دارد (01/0 <p). ژنوتیپ CC بیشترین (13/2 میلی گرم بر دسی لیتر) و ژنوتیپ GG کمترین تیتر آنتی بادی کل (33/0 میلی گرم بر دسی لیتر) را نشان داد. پیشنهاد می شود آثار منفی این چندشکلی تک نوکلیوتیدی در برنامه های اصلاح نژادی در نظر گرفته شود.

    کلید واژگان: ایمنی همورال، بلدرچین ژاپنی، چندشکلی، ژن DMB2، PCR-RFLP
    H. Chenani, M. Nazari *, M. T. Beigi Nassiri, H. Roshanfekr, A. Aghaei

    The DMB2 gene is one of the MHC cluster genes that plays a role in the humoral immune response. This study was performed to identify the polymorphism of exon 2 of the MHC-DMB2 gene and its association with the humoral immune response in Japanese quail. For this purpose, on day 28, 0.2 mL of 5% saline suspension of sheep red blood cell (SRBC) was injected into 130 quail's breast muscle (65 males and 65 females). Seven days later, cervical vein blood sampling was performed on the 35th day. Afterward, the anti-SRBC titer antibody was determined using a micro hemagglutination technique. Also, genomic DNA was extracted from blood samples and a 333bp fragment of exon 2 was amplified using polymerase chain reaction and PCR products were digested by Hinf 1 restriction enzyme. The results showed that there were two types of C (333bp) and G (226, 107bp) alleles in this region with a frequency of 74.6% and 26.4% in the whole population, respectively. The results indicate high polymorphism and high homozygosity in the studied population. In addition, the results showed that genotype had a significant effect on antibody titers (P<0.01). The CC genotype showed the highest total antibody titer (2.13 mg/dL) and the GG genotype showed the lowest total antibody titer (0.33 mg/dL). It is suggested that the negative effects of this single nucleotide polymorphism be considered in breeding programs.

    Keywords: Humoral immunity, Japanese quail, Polymorphism, DMB2 gene, PCR-RFLP
  • مرجان قربانی، محمدحسین مرادی*، امیرحسین خلت آبادی فراهانی، مهدی میرزایی
    سابقه و هدف

    فراتحلیل (متاآنالیز) روشی آماری برای یکی کردن نتایج حاصل از تحقیقات مستقل با فرضیه های مشابه است که در تحقیقات دامی می تواند منجر به افزایش توان تجزیه آماری و نیز بالا بردن تکرارپذیری نتایج، نسبت به تحقیقات انفرادی شود. چندشکلی ژن های بزرگ اثر دی آسیل گلیسرول آسیل ترانسفراز 1 (DGAT1) و لپتین در طی سال های اخیر به خاطر اثرات احتمالی آن ها روی صفات مهم اقتصادی در تحقیقات مختلف، توسط محققین علوم دامی مورد توجه قرار گرفته است. با این وجود، ارتباط بین این ژن ها و صفات مرتبط با تولید شیر در نژادهای مختلف گاو شیری متناقض، یعنی گاهی معنی دار و گاهی نیز بدون ارتباط معنی دار گزارش شده است. هدف از پژوهش حاضر، بررسی اثرات کلی ژن های DGAT1 و لپتین روی برخی از صفات مهم اقتصادی شامل میزان تولید شیر، مقدار و درصد چربی و پروتئین شیر در گاوهای شیری به روش فراتحلیل بود.

    مواد و روش ها

    در این پژوهش، از مطالعات منتشر شده در مجلات و پایان نامه های معتبر تا سال 2018 استفاده شد. پس از انجام مراحل مختلف کنترل کیفیت، به ترتیب از 9 و 4 تحقیق گزارش شده برای جایگاه های K232A و Sau3AI مربوط به ژن های DGAT1 و لپتین، استفاده شد. این بررسی با استفاده از نرم افزار Stata v. 15انجام شد. شاخص عدم تجانس (I2) برای همه پارامترها معنی دار بود، بنابراین از مدل اثرات تصادفی استفاده شد. داده ها برای هر متغیر با استفاده از این مدل ها، برای تخمین اندازه اثر، دامنه اطمینان 95 درصد و سطح معنی داری آماری، آنالیز شدند. تمام متغیرها در این مطالعه به صورت داده های پیوسته بودند. اندازه اثر برای داده های پیوسته، تفاوت میانگین استانداردشده بود که برای چندشکلی K232A ژن DGAT1 و چندشکلی Sau3AI ژن لپتین، روی مقدار و درصد چربی و پروتئین، و مقدار تولید شیر محاسبه شد.

    یافته ها

    نتایج این تحقیق نشان داد که چندشکلی جایگاه ژنی K232A در ژن DGAT1 اثر معنی داری روی درصد و مقدار چربی شیر داشته و می تواند نقش مهمی در افزایش مقدار آن ها ایفا کند، اما ارتباط آن با درصد و مقدار پروتئین و همچنین میزان تولید شیر معنی دار نیست. همچنین نتایج بررسی چندشکلی جایگاه ژنی Sau3AI ژن لپتین نشان داد که این جایگاه با هیچ یک از صفات مورد بررسی ارتباط معنی داری ندارد.

    نتیجه گیری

    در مجموع، نتایج حاصل از این تحقیق با شناسایی اثرات کلی ژنوتیپ های مورد مطالعه ژن های DGAT1 و لپتین روی صفات مرتبط با تولید شیر در گاوهای شیری، می تواند نقش مهمی در برنامه ریزی تحقیقات بعدی در این زمینه داشته باشد.

    کلید واژگان: چند شکلی، لپتین، دی آسیل گلیسرول آسیل ترانسفراز 1، گاو شیری
    Marjan Ghorbani, MohammadHossein Moradi *, Amirhossein Farahani, Mehdi Mirzaei
    Background and objectives

    Meta-analysis is a statistical approach for combining the results from independent studies with the same assumptions, that is able to increase the statistical analysis power and the repeatability of the results in the livestock researches, comparing to single-study analysis. The polymorphism in the major genes of Diacylglycerol O-Acyltransferase 1 (DGAT1) and Leptin have drawn much attention from animal scientists during recent years, for their possible roles in the economically important traits. However, the relationships between these genes and milk production traits have been incompatible in dairy cows, it means sometimes significant and some other times no significant association has been reported. The purpose of this study was to investigate the overall effect of DGAT1 and Leptin genes on some economically important traits including milk yield, fat and protein content and percentages in dairy cows by using meta-analysis.

    Materials and methods

    in this study, all researches published in the validated journals and thesis up to 2018 were used. Following to quality control, 9 and 4 studies reported for K232A and Sau3AI polymorphisms of DGAT1 and Leptin genes were used, respectively. The analysis was carried out using the Stata v. 15. Non conformance index (I 2) was significant for all parameters, so that a random risk model was used. Data were analyzed for each variable using these models for measuring the effect size, 95% confidence interval and statistical significance level of the measurements. All variables were continuously in this study. The measurement of the effect size for continuous data was carried out using the standardized mean difference (SMD) that calculated for the polymorphisms of K232A and Sau3AI loci in DGAT1 and Leptin genes on the milk yield, fat and protein content and percentage.

    Results

    the results of this study showed that the polymorphism in the K223A locus of DGAT1 gene, has a significant effect on lipid content and percentage, and can play an important role in increasing of their amounts, but its relationship with milk yield and protein content and percentage is not significant. Also, the results for Sau3AI polymorphism in the Leptin revealed that this locus had no significant effect on the traits investigated in this study.

    Conclusion

    Overall, the results of this study with identifying the overall effects of the studied genotypes of DGAT1 and Leptin genes on milk production traits in dairy cows can play an important role for planning next researches in this field.

    Keywords: Polymorphism, Leptin, Diacylglycerol O-Acyltransferase 1 (DGAT1), Dairy Cattle
  • احمد احمدی*، محیا محمدزاده، پویا زمانی، عباس فرح آور، رضا طالبی

    در اقلیم های مختلف، نقش مقاومت سلولی به استرس های ناشی از تغییر دما از طریق خانواده ای از پروتئین ها که اصطلاحا، پروتئین های شوک گرمایی (HSP) نامیده می شوند، کنترل می شود. در پژوهش حاضر، شناسایی چند شکلی های تک نوکلیوتیدی موجود در مناطقی از ژن HSP70A1A در گوسفند بومی نژاد مهربان و گوسفند وارداتی نژاد رومانف به جهت ویژگی این نژادها به سازگاری در اقلیم های سردسیری، بررسی شدند. در مجموع، تعداد 141 حیوان شامل گوسفند نژاد مهربان (100 راس) و گوسفند نژاد رومانف (41 راس)، به طور تصادفی انتخاب و مراحل خونگیری و استخراج DNA طبق دستورالعمل های متداول انجام شد. سپس، واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) جهت تکثیر اگزون ژن HSP70A1A (Oar_v4.0; Chr20, NC_019477.2) به اندازه 247 و 298 جفت باز انجام شد. همچنین، جهت تعیین چند شکلی نمونه ها از تکنیک PCR-SSCP و متعاقب آن، توالی یابی مبتنی بر سانگر استفاده شد. بر اساس نتایج SSCP، به طور مشابه در هر دو نژاد مهربان و رومانف تعداد 5 الگوی باندی مشاهده شد که قطعات تکثیر شده 247 و 298 جفت بازی به ترتیب دو و سه الگوی الکتروفوزی را دارا بودند. علاوه بر این، هیچ تفاوتی در فراوانی الگوهای مشاهده شده بین این دو نژاد گوسفند یافت نشد. همچنین، در این نژادها نتایج توالی یابی وجود تعداد 5 چند شکلی تک نوکلیوتیدی (SNP) شامل g.26562252C>A، g.26562261G>C، g.26562270T>C، g.26562273C>T و g.26562279C>T در قطعه 247 جفت بازی و تعداد سه چند شکلی تک نوکلیوتیدی شامل g.26561745T>C، g.26561784C>T و g.26561877G>A در قطعه 298 جفت بازی شناسایی نمود. در مجموع، نتایج نشان داد که، همه چند شکلی ها به غیر ازg.26561745T>C  و g.26561877G>A به طور معنی داری خارج از تعادل هاردی واینبرگ هستند (05/0p<). به عنوان نتیجه گیری نهایی، با توجه به نقش پروتئین های شوک دمایی در مقاومت به استرس های محیطی، شناسایی این چند شکلی ها می تواند تاثیر بسزایی در درک مکانیسم سازگاری  به تحمل دمایی در نژادهای گوسفندان بومی ایرانی داشته باشد.

    کلید واژگان: تحمل سرمایی، چندشکلی نوکلئوتیدی، ژن HSP70A1A، گوسفند رومانف، گوسفند مهربان
    Ahmad Ahmadi*, Mahaya Mohammadizade, Pouya Zamani, Abbas Farah Avar, Reza Talebi

    The heat shock proteins (HSPs) are a family of proteins contributing to cellular resistance against a variety of thermal stresses in different climates. In this study we aimed to characterize polymorphisms of the ovine HSP70A1A gene in Mehraban indigenous sheep breed and Romanov imported sheep breed, because they are well adapted to the cold climate. Blood samples were collected from a total of 141 sheep (100 Mehraban and 41 Romanov), and then genomic DNA was extracted according to conventional instructions. Polymerase chain reaction (PCR) was performed to amplify the 247 bp and 298 bp of the exon region of the HSP70A1A gene (Oar_v4.0; Chr 20, NC_019477.2). Also, polymorphisms of the studied fragments were explored using single strand conformational polymorphism (SSCP) technique and then the amplified DNA fragments were sequenced by Sanger sequencing method. In both Mehraban and Romanov breeds, five distinct SSCP patterns were identified that two and three electrophoretic patterns were respectively related to 247 bp segment and 298 bp segments. Furthermore, frequencies of SSCP patterns showed no differences between breeds. Five single nucleotide polymorphisms (SNPs) including g.26562252C>A, g.26562261G>C, g.26562270T>C, g.26562273C>T and g.26562279C>T were identified in 247 bp segment, and also, three SNPs including g.26561745T>C, g.26561784C>T and g.26561877G>A were identified in 298 bp segment of PCR products. Results revealed that all SNPs were in Hardy–Weinberg disequilibrium (p < 0.05), except of g.26561745T>C and g.26561877G>A. Considering the role of HSPs in resistance to the environmental stresses, it can be conclude that the identification of  these SNPs can  play an important role on understanding the mechanism of adaptation  to temperature tolerance among the Iranian indigenous sheep breeds.

    Keywords: Cold tolerance, HSP70A1A gene, Mehraban sheep, Polymorphism, Romanov sheep
  • سکینه هزارسی بوری*، محمدتقی بیگی نصیری، هدایت الله روشنفکر، محمود نظری

    در مطالعه حاضر برای شناسایی چند شکلی ناحیه اگزون 2 ژن MHC (مجتمع اصلی سازگاری بافتی) و ارتباط آن با صفات رشد (وزن تولد و سه ماهگی) در جمعیت بز عدنی، از تعداد 97 راس بزعدنی استان بوشهر خون‏گیری انجام گرفت. DNA ژنومی از نمونه‏های خون استخراج و قطعه ‏ای به اندازه 279 جفت باز از ناحیه اگزون 2 ژن MHC با استفاده از واکنش زنجیره‏ای پلی‏مراز (PCR) تکثیر و محصولات PCR به دست آمده به وسیله آنزیم برشی Ras I هضم شدند. نتایج بدست آمده حاکی از وجود 4 نوع آلل A، B، C و D در این جایگاه بود که فراوانی آن‏ها در کل جمعیت به ترتیب 51، 8/26، 4/13 و 8/8 درصد محاسبه شد. تعداد 5 ژنوتیپ AA، AB،BB ، AC و AD شناسایی شدند که فراوانی ژنوتیپی محاسبه شده آن‏ها در جمعیت به ترتیب برابر 432/14، 866/28، 371/12، 80/26 و 52/17 درصد بود.‏‏ نتایج نشان دهنده ‏ی وجود چند شکلی و میزان هتروزیگوسیتی بالا در جمعیت مورد مطالعه ابود. تعداد آلل موثر، شاخص شانون، هتروزیگوسیتی مورد‏انتظار و مشاهده شده برای این جایگاه به ترتیب 794/2، 179/1، 642/0 و732/0 محاسبه شد. بعلاوه، آزمون کای مربع نشان داد که جمعیت در جایگاه MHC-DRB1 در تعادل هاردی-‏وینبرگ قرار ندارد. نتایج نشان داد که تاثیر ژنوتیپ ‏های مختلف بر وزن تولد معنی‏ دار بود (05/0p<) اما بر وزن سه ماهگی معنی‏ دار نبود (05/0< p). بعلاوه، سایر صفات مثل سن مادر، جنسیت، فصل و تیپ تولد روی هیچ کدام از صفات رشد بدن معنی‏ دار نشد (05/0<p). بیشترین وزن تولد مربوط به ژنوتیپ‏ های هتروزیگوت AC و AD (05/3 و 02/3 کیلوگرم) و کمترین وزن تولد مربوط به ژنوتیپ خالص AA (75/1 کیلوگرم) بود. به نظر می‏رسد با انتخاب ژنوتیپ AC و AD بتوان افزایش وزن تولد را در بز عدنی انتظار داشت. همچنین  می توان از این ژن به عنوان یک ژن کاندیدا برای بهبود ژنتیکی برخی از صفات رشد در برنامه های اصلاح نژادی بز مورد توجه قرار گیرد.

    کلید واژگان: چند شکلی، ژنMHC، بز عدنی، PCR-RFLP
    Sakineh Hezarsi Bori*, Mohammad Taghi Beigi Nassiri, Hedayatallah Roshanfekr, Mahmood Nazari

    In the present study, blood samples were collected from 97 Adani goat from Bushehr province in order to identify the polymorphism in the exon II region of MHC-DRB1 gene (Major Histocompatibility Complex) and also, its association with growth traits (birth weight and 3 months weight). Genomic DNA was extracted from blood samples. A 279-bp fragment was amplified using polymerase chain reaction (PCR). Eventually, the PCR products were digested by RasI enzyme. The results showed that there were 4 types of alleles A, B, C and D in this locus with the frequencies of %51, %26.8, %13.4 and %8.8, respectively. Five genotypes including AA, AB, BB, AC and AD were identified with the frequency of %14.432, %28.866, %12.371, %26.80 and %17.525, respectively. The results indicated polymorphism and high heterozygosity in the population under study. Also, the number of effective alleles, Shannon index, expected and observed heterozygosity for this site was calculated at 2.794, 1.179, 0.642 and 0.732, respectively. Moreover, the chi-square (χ2) test showed that population was not in Hardy-Weinberg equilibrium. The ANOVA results showed that the effect of different genotypes on birth weight was significant (p<0.05), but it was not significant on 3 MW (p<0.05). Furthermore, other traits such as dam age, sex, season and birth type effects were not significant on the growth traits (p<0.05). The highest birth weight was found for heterozygous AC and AD genotypes (3.05 and 3.02 Kg, respectively), and the lowest birth weight was related to pure AA genotype (1.75 Kg). It seems that selecting AC and AD genotypes can be expected to increase birth weight in Adani goat. Also, we expect that this gene can act as a candidate gene for genetic improvement of some growth traits in goat breeding programs.

    Keywords: Polymorphism, MHC Gene, RFLP, Adani Goat
  • Mansooreh Rajaei Nejad, Ahmad Ayatollahi Mehrgardi *, Vahideh Rezaei, Ali Esmailizadeh
    This study was carried out to investigate the polymorphisms of bone morphogenetic protein 15 (BMP15) exon 2 in purebred Kermani and crossbred Romanov × Kermani sheep and functional analysis of the underlying mutations. A number of 50 purebred Kermani and 115 F1 Romanov (ram) × Kermani (ewe) crossbred sheep were sampled and a 153 bp fragment from exon 2 of the ovine BMP15 gene was successfully amplified from the genomic DNA of each animal using designed primers. The polymerase chain reaction-single-strand conformation polymorphism (PCR-SSCP) technique was used to investigate the polymorphism of BMP15 gene (exon 2(. Twenty samples of different SSCP patterns were randomly selected for DNA sequencing and detecting the BMP15 mutations and subsequent functional analyses. The polymorphic fragments amplified by designed primers were sequenced. There were eight SSCP patterns (AA, AB, BB, AC, AD, AE, AF and AG) with frequencies of 0.24, 0.17, 0.24, 0.08, 0.05, 0.10, 0.03 and 0.09, respectively. The frequency of A allele was obviously higher than those of other alleles. The sequencing results revealed two single nucleotide mutations; the first mutation at position 32bp which did not cause any change in the amino acid sequence but the second mutation led to a change in 40th amino acid (a Lysine amino acid replaced by an Asparagine amino acid). The result of this experiment indicates that the genetic diversity level of BMP15 exon 2 gene was high in the Romanov × Kermani crossbreds indicating that BMP15 exon 2 can played a vital function in the development of ovary and follicles, especially in the improvement of fertility trait and could be used as a potential advantageous molecular marker for reproduction traits in this genetic group. Our finding provides exciting new opportunities for understanding the role of the BMP15 on ovarian follicular growth and development in crossbreed ewes in breeding programs.  However, further investigation using a large population of Romanov × Kermani crossbred sheep is required to confirm the link between the identified mutation and the observed increased prolificacy in this population.
    Keywords: BMP15, PCR-SSCP, polymorphism, Romanov × Kermani sheep
  • مریم قلی زاده*، جمال فیاضی، رضا ولی زاده، حامد خراتی کوپایی، غلامرضا داشاب

    در این مطالعه چندشکلی‏ چهار جایگاه ریزماهواره‏ای BMS1915، BMS1350، LGB وILSTS45 در کروموزوم 3 و ارتباط آن‏ها با صفت وزن پشم در گوسفندان بلوچی مورد بررسی قرار گرفت. به این منظور استخراج DNA از نمونه‏های خون جمع‏آوری شده از 185 راس گوسفند نژاد بلوچی ایستگاه عباس آباد مشهد انجام شد. قطعات ژنی مربوط به جایگاه های ریزماهواره ای توسط واکنش زنجیره ای پلی مراز و با استفاده از آغازگرهای اختصاصی تکثیر شدند. نتایج نشان داد آلل E در جایگاه BMS1915 با 40/0، آللD در جایگاه BMS1350 با 30/0، آلل B در جایگاه LGB با 48/0 و آلل A در جایگاه ILSTS45 با 46/0 دارای بیشترین فراوانی بودند. نتایج مقایسه میانگین نشان داد جایگاه ریزماهواره LGB دارای بیشترین میزان تولید پشم و جایگاه ریزماهواره ILSTS45 دارای کمترین میزان تولید پشم می باشد. همچنین درجایگاه LGB ژنوتیپ AC دارای بیشترین (7/95± 1308 گرم) و ژنوتیپ BC دارای کمترین (7/54±875 گرم) میزان تولید پشم است. با مقایسه ضریب تغییرات 4 جایگاه مشخص شد که بیشترین تنوع و پراکندگی مربوط به جایگاه ریزماهوارهILSTS45 و کمترین میزان تنوع مربوط به جایگاه BMS1350 می باشد. از طریق آزمون کای مربع مشخص شد همه جایگاه‏ها در تعادل هاردی-واینبرگ قرار دارند (05/0(P>. ارزیابی نتایج آنالیزهای آماری نشان داد چند شکلی جایگاه های مورد مطالعه با تولید پشم در گوسفندان بلوچی ارتباط معنی‏داری ندارند (05/0(P> . بنابراین نتیجه گیری می شود که با انجام تحقیقات بعدی در زمینه مطالعات مبتنی بر انتخاب بر اساس نشانگرهای مولکولی، می توان ارتباط این جایگاه ها را با سایر صفات در گوسفند بلوچی مورد بررسی قرار داد.

    کلید واژگان: ریز ماهواره، چندشکلی، PCR-RFLP، گوسفند بلوچی، صفت پشم
    M. Gholizadeh *, Jamal Fayazi, Reza Valizadeh, Hamed Hamed Kharrati Koopaee, Gholam Reza Dashab

    In this study, the polymorphism of four microsatellite loci BMS1350, LGB, ILSTS45, and BMS1915 in chromosome 3 and their association with wool trait were investigated in Baluchi sheep. DNA extraction was performed from blood samples of 185 Baluchi sheep from Abbas Abad Breeding Station. Gene fragments of microsatellites were amplified by polymerase chain reaction with specific primers. The result shown allele E in BMS1915 locus with 0.40, Allele D in BMS1350 locus with 0.30, Allele B in LGB locus with 0.48 and Allele A in ILSTS4 locus with 0.46, had the highest frequency. The results of the Comparison of mean shown the LGB locus has the highest and ILSTS45 locus has the lowest production. Also, genotype AC in the LGB locus highest (1308 ±95.7) and genotype BC had the lowest (875 ± 54.7) of production. By comparing the coefficient of variation 4 loci founded that the greatest diversity and dispersion associated with the ILSTS45 and the lowest diversity associated with BMS1350 locus. Chi-square test (χ2) shown all of the microsatellite loci were in the Hardy-Weinberg equilibrium (P>0.05). Association analysis of polymorphism these loci shown there is no significant association between polymorphism of these loci and wool trait in Baluchi sheep (P>0.05). Statistical analysis showed there was no significant difference between loci polymorphisms and wool traits. Therefore, concluded in further research on selected studies based on molecular markers, the relationship between these loci and other traits in the Balochi sheep can be examined.

    Keywords: microsatellite, Polymorphism, Baluchi sheep, Wool trait
  • سجاد شهدادی ساردو، مهدی وفای واله*، غلامرضا داشاب، محمد رکوعی
    نشان داده شده است که بروز هر گونه تغییر در عملکرد ژنهای DNMTs اثرات شگرفی بر فرآیند تکوین جنین و نیز وزن تولد در پستانداران دارد، لذا هدف از انجام این تحقیق بررسی چندشکلی ژن های خانواده DNA متیل ترانسفراز و ارتباط آن ها با وزن تولد در گاو سیستانی بود. خون گیری به طور تصادفی از 60 راس گاو سیستانی به عمل آمد. استخراج DNA با استفاده از روش فنول کلروفرم انجام شد. نواحی کاندیدا برای وجود جهش شامل قطعه های 114 جفت بازی واقع در اگزون 33 ژن DNMT1، قطعه 176 جفت بازی واقع در اینترون 4 ژن DNMT3a و قطعه 207 جفت بازی واقع در اینترون 3 ژن DNMT3b توسط واکنش زنجیره ای پلی مراز تکثیر شدند. به منظور بررسی وجود چند شکلی در ژن های هدف از روش PCR-SSCP به وسیله ی ژل پلی آکریل آمید و رنگ آمیزی نیترات نقره استفاده گردید. ارزیابی نتایج دلالت بر عدم وجود تنوع الگوهای باندی در تمام نمونه های مورد بررسی داشت. بر اساس نتایج این مطالعه به نظر می رسد که عدم مشاهده تنوع ژنتیکی در نواحی مورد بررسی احتمالا دلالت بر انتخاب بر علیه وقوع جهش های خاص در جمعیت مورد نظر دارد. در مجموع براساس نتایج این مطالعه ارزیابی تنوع ژنتیکی در نواحی مورد بررسی، جهت شناسایی مارکرهای موثر در برنامه های اصلاحی صفات تولیدی در گاو سیستانی فاقد کارایی می باشد
    کلید واژگان: ژن های DNA متیل ترانسفراز، چند شکلی، گاو سیستانی، PCR-SSCP
    Sajjad Shahdadi Sardo, Mehdi Vafaye Valleh *, Gholam Reza Dashab, Mohammad Rokouei
    It has been shown that the occurrence of any changes in the function of DNMTs genes has a significant effect on both the embryo development and birth weight in mammals; therefore, the aim of the present study was to investigate the presence of DNA polymorphisms in the members of DNA methyl transferase superfamily and its relationship with birth weight in Sistani cattle’s. Blood sampling was done randomly from 60 Sistani cows. DNA extraction was performed using phenol chloroform method. Candidate region for the presence of functional polymorphism within the DNMTs gene including the 114-bp fragment of the exon 33 of the DNMT1 gene, the 176-bp fragment of the intron 4 of the DNMT3a gene, and the 207-bp fragment in intron 3 of the DNMT3b gene were amplified by polymerase chain reaction. PCR-SSCP followed by polyacrylamide gels silver stain analysis was done to evaluate the presence of candidate mutations in target gens. The result analysis of all analyzed region did not show any mutations in the investigated DNMTs genes. Based on the results of this study, it seems that the lack of observation of genetic diversity in the studied regions could be related to the evolutionary selection against occurrence of specific mutations in the analyzed population. In general, based on the results of this study, analysis of genetic diversity in the studied genomic region may not be effective in identifying effective markers for breeding programs in Sistani cows.
    Keywords: DNA Methyltransferases Genes, Polymorphism, Sistani cattle, PCR-SSCP
  • ابوالفضل قربانی*، مصطفی به پایی

    به منظور بررسی ارتباط جایگاه های ژن کاندیدا GDF9 با صفات کیفی و کمی اسپرم در گاوهای نر هلشتاین ایران، از تعداد 108 نمونه خون و اسپرم گاوهای نر موجود در مرکز تلقیح مصنوعی که بین سال های 1395-1368 متولد شده بودند، استفاده شد. برای تعیین SNP جایگاه های A625T و A489T با روش PCR- RFLP  به ترتیب از آنزیم های DraI و NsiI استفاده شد. در جایگاه A625T دو الل A با طول قطعات 351 و 25 جفت باز و الل T با طول 376 جفت باز و در جایگاه A489T دو الل A با طول قطعات 184 و 24 جفت باز و الل T با طول 208 جفت باز به دست آمد. بررسی نتایج فراوانی نشان داد که در هر دو جایگاه الل T و ژنوتیپ TT گاوهای نر هلشتاین ایران فراوان تر بود. بررسی نتایج تجزیه واریانس نشان داد که اثر هر دو جایگاه بر کلیه صفات کیفیت اسپرم در گاوهای نر هلشتاین ایران معنی دار بود. مقایسات بین میانگین ژنوتیپ ها نشان داد که در هر دو جایگاه گاوهای با ژنوتیپAT  به طور معنی داری در صفات حجم انزال، جمعیت اسپرم، تعداد کل اسپرم و تعداد دز اسپرم تولیدی نسبت به بقیه ژنوتیپ ها دارای مقادیر بالاتری هستند. در صفات جنبندگی بعد از انزال و جنبندگی بعداز یخ گشایی ژنوتیپ TT دارای مقادیر بالاتر معنی دار را نشان داد. نتایج نشان داد که می توان از این جایگاه ی نشانگری در انتخاب ژنومی سود برد.

    کلید واژگان: GDF9، پلی مورفیسم، کیفیت اسپرم، گاوهای نر هلشتاین ایران
    Abolfazl Gorbani*, Mostafa Behpai

    The use of artificial insemination in dairy cattle industry may improve the results of selection for production traits. This study attempts to evaluated effect of GDF9A625T and GDF9A489T candidate gene polymorphism on the sperm quality and quantity traits in Iranian bulls. A total of 108 samples of blood and semen was collected of A. I. bulls were born between 1989-2016 years. The GDF9A625T and GDF9A489T SNPs was determined by PCR- RFLP with DraI and NsiI enzymes, respectively. In A625T site, A (351 and 25 bp) and T (376 bp) alleles and in A489T site, A (184 and 24 bp) and T (208bp) alleles was obtained and also three AA, AT and TT genotypes in two marker sites were observed. The frequency results of GDF9A625T site showed that the T allele relative to the A allele was more frequent in Iranian Holstein bulls (0.6343 vs 0.3657) and 44.44, 37.98 and 17.95 percent of bulls had TT, AT and AA genotypes, respectively. In GDF9A625T site, the T allele frequency was more than A allele (0.602 vs 0.398) and 40.82, 38.78 and 20.14 percent of bulls had TT, AT and AA genotypes, respectively. Analysis of variance revealed that the effects of both loci were significant effect on sperm quality in Iranian Holstein bulls. The result of means comparison between genotypes in two marker sites showed that bulls with AT genotype significantly high value in quantitative trait and AA genotype was significantly higher in qualitative trait. Results of this research showed that these marker sites can be beneficial in genomic selection.

    Keywords: Gdf9, Polymorphism, Sperm Quality, Iranian Holstein Bulls
نکته
  • نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شده‌اند.
  • کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شده‌است. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
  • در صورتی که می‌خواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.
درخواست پشتیبانی - گزارش اشکال