دکتر جواد بهارآرا
-
ObjectiveGranulosa cell tumor (GCT) is a sex cord-stromal rare malignancy; and is associated with infertility. Extracellular vesicles (EVs) are small secreted vesicles containing proteins, mRNA, and miRNA, therefore modulating signaling pathways potentially in recipient cells and in this way, they can help cancer spread through intercellular communication. In this research, the capability of ovarian cancer-derived EVs for inducing proliferation and metastasis in GCs is investigated.Materials and MethodsIn the experimental study, EVs were isolated by ultracentrifugation from A2780 human ovarian cancer cell-conditioned. Mouse GCs were mechanically isolated from 8 female mice. ovarian cancer-derived EVs were then added to the GCs (experimental groups: untreated GCs (control group), GCs treated with concentrations of 10, 25, and 50 μg/ml), and cell viability, migration, apoptosis, and estrogen hormone measurements were assessed by MTT, scratch assay, propidium iodide (PI) staining, annexin-V-FITC/PI and ELISA assay respectively. Gene's expression of Amh, Foxl2, Gdf-9, and Igf-1r were determined using real-time polymerase chain reaction (PCR).ResultsGCs treated with ovarian cancer EVs indicate an increase in cell viability compared to the control cells (P<0.05). Also, ovarian cancer EVs showed an increase in the migration potency. The other results this experimental study showed that ovarian cancer EVs increase in the estrogen secretion level (P<0.001) and reduce the apoptosis of GCs compared to the control group. It is further showed that EVs isolated from ovarian cancer (A2780 cell line) can induce the RNA expression level of several genes in recipient GCs, such as Amh, Foxl2, and Igf-1r (P<0.01, P<0.001), respectively, while the RNA expression level of Gdf-9 gene was decreased in comparison with the control.ConclusionTo sum up, the research here provides a novel insight into the role of ovarian cancer EVs in proliferation and metastasis in GCs and prevention of infertility caused by granulosa cancer.Keywords: Extracellular Vesicles, Gene Expression, Granulosa Cell Tumor, Ovarian Cancer, Proliferation
-
Objective (s)
The current study aims to achieve synthesized selenium nanoparticles (Se-NPs) through a green chemistry route using sodium selenite (Na2SeO3) and Caccinia macranthera (C. macranthera) plant extract as stabilizing and reducing agents and to investigate the anticancer effects of the synthesized NPs.
Materials and MethodsThe outcomes affirmed the successful production of the synthesized Se-NPs, as their spherical framework and particle size scale of 54 to 60 nm were exhibited by the images of FESEM/PSA. This spherical frame was also detected in the TEM images at a size of 11.5 nm. The inhibitory effect of Se-NPs was investigated on the proliferation of human liver cancer cells (Huh-7). Additionally, the effect of Se-NPs was studied on the expression of the implicated genes throughout the cell apoptosis using the Real-Time PCR technique. Also, the percentage of apoptotic cells was obtained using Annexin V/PI and DAPI kits. Finally, flow cytometry was exerted to determine the amount of produced ROS.
ResultsThe results of laboratory studies showed that Se-NPs can significantly reduce the survival of Huh-7 cancer cells in dosage and time-reliant behavior, while they have very little toxicity on normal L929 cells. Also, Se-NPs were able to induce apoptosis in liver cancer cells, which was observed along with the increased expression of Bax, p53, Caspase3, and Caspase 9 genes. In addition, Se-NPs increased the production of ROS in Huh-7 cells and led to an increase in oxidative stress in these cells.
ConclusionTherefore, these NPs can be used in clinical studies of liver cancer.
Keywords: Antioxidants, Apoptosis, Caccinia Macranthera Plant, Cytotoxins, Selenium Nanoparticles -
Introduction
Intestinal colitis, also known as ulcerative colitis, is an inflammatory bowel disease characterized by long-term inflammation and ulcers in the gastrointestinal tract. It has been suggested that the mucosal expression of angiotensin II (AT-II) is increased in colitis. This study aimed to examine the potential therapeutic effects of combination therapy with Enalapril, an angiotensin-converting enzyme inhibitor, and sulfasalazine (SSZ) in a murine colitis model.
MethodsMale C57BL/6 mice were divided into five groups: control group (distilled water), dextran sulphate sodium (DSS) group (colitis group) (1% DSS), SSZ group (positive control group) with 100 mg/kg/day, Enalapril alone group with 4 mg/kg/day, and Enalapril (4 mg/kg/day) + SSZ (100 mg/kg/day) group.
ResultsThere was a significant reduction in the disease activity index among the mice receiving the combination of Enalapril and SSZ compared to the colitis group. Enalapril and SSZ treatment was associated with a lower reduction in colon length, decreased colon weight, spleen weight, and spleen-to-body weight in mice with colitis. Following DSS administration, Enalapril and SSZ also significantly decreased MDA levels, an oxidant marker, and increased total thiol, SOD, and CAT levels, as antioxidants. Additionally, mucosal damage, crypt loss, pathological changes, and inflammation scores decreased after treatment with Enalapril and SSZ in comparison with the colitis group. The combination of Enalapril and SSZ reduced colon collagen content and caused a decrease in fibrosis compared to the colitis group.
ConclusionThe results of this study indicated that Enalapril alone and in combination with SSZ decreased inflammation and clinical symptoms of colitis induced by DSS.
Keywords: Colitis, Angiotensin-Converting, Enzyme Inhibitor, Enalapril, Inflammation -
مجله دانشگاه علوم پزشکی اراک، سال بیست و هفتم شماره 3 (پیاپی 169، امرداد و شهریور 1403)، صص 137 -145مقدمه
هارمین، یک آلکالوئید از دسته کربولین از خانواده اسپند و گیاهی است که در طب سنتی کاربرد فراوانی دارد. مطالعات متعددی بر اثرات ضد سرطانی آن تاکید می کند. از آن جایی که فرایندهای بیولوژیکی تحت تاثیر میدان های الکترومغناطیسی می باشند، در مطالعه حاضر اثرات ضد سرطانی هارمین و میدان الکترومغناطیسی با فرکانس کم بر بیان ژن های COX2، A VEGF و MMP-2 در رده سلولی A2780 بررسی شد.
روش کاردر این پژوهش تجربی- آزمایشگاهی، رده سلولی سرطان تخمدان در 4 گروه شاهد، هارمین با غلظت های (6، 12، 24، 48، 96، 192 میکرومولار)، میدان الکترومغناطیسی با فرکانس کم و شدت 50 گوس و هارمین با غلظت 48 میکرو مولار و میدان الکترومغناطیسی با فرکانس کم و شدت 50 گاوس به صورت تصادفی تقسیم شدند. سمیت آن ها با آزمون MTT، تغییرات ریخت شناسی هسته با رنگ آمیزی DAPI، اثرات آپوپتوزیس این ترکیبات با اندازه گیری نیتریک اکساید NO)) و تغییرات بیان ژن ها نیز به روش Real Time PCR بررسی گردید. داده های کمی با استفاده از آزمون آماری ANOVA در سطح 0/05 > P تجزیه و تحلیل شدند.
یافته هامقایسه داده های کمی این پژوهش نشان داد که هارمین و میدان الکترومغناطیسی با فرکانس کم و شدت 50 گوس به صورت وابسته به غلظت باعث کاهش زیست پذیری در سلول های سرطان تخمدان شد و همچنین در تست نیتریک اکساید گروه شاهد با گروه های تیماربا غلظت 48 میکرومولار و هم افزایی با میدان الکترومغناطیسی با فرکانس 50 گوس کاهش معنی دار یافته است (0/05 > P)، بیان ژن های فوق در سلول های تحت تیمار کاهش معنی دار نشان داد و تیمار سلول های سرطان تخمدان با هارمین و کاربرد توام آن باعث تغییرات ریخت شناسی هسته ازجمله تراکم کروماتین، تشکیل اجسام آپوپتوزی و چروکیدگی غشای سلول شد.
نتیجه گیریکاربرد توام هارمین و میدان الکترومغناطیسی با فرکانس کم، باعث القای آپوپتوزیس در سلول های سرطانی A2780 و سبب کاهش بیان ژن های COX2 وA VEGF و MMP-2 شد. در نتیجه کاربرد توام هارمین با میدان الکترومغناطیسی با فرکانس کم به دلیل داشتن سمیت سلولی موثر در مهار تکثیر و القا آپوپتوز می تواند کاندیدای مناسبی جهت مطالعات کلینیکی باشد.
کلید واژگان: رده سلولی A2780، هارمین، میدان الکترومغناطیسیIntroductionHarmine is an alkaloid from the carboline family, belonging to the harmal plant, which has extensive applications in traditional medicine, with numerous studies highlighting its anti-cancer effects. Since biological processes are influenced by electromagnetic fields, the current study examined the anti-cancer effects of harmine and low-frequency electromagnetic fields on the expression of COX2, VEGF, and MMP-2 genes in the A2780 cell line.
MethodsIn this experimental-laboratory study, ovarian cancer cell lines were randomly divided into four groups: control, harmine at concentrations of 6, 12, 24, 48, 96, and 192 micromolar, low-frequency electromagnetic field with an intensity of 50 Gauss, and harmine at a concentration of 48 micromolar with a low-frequency electromagnetic field of 50 Gauss intensity. Their toxicity was assessed using the MTT assay, nuclear morphological changes by DAPI staining, apoptotic effects of these compounds by measuring nitric oxide (NO), and gene expression changes by Real-Time PCR. Quantitative data were analyzed the ANOVA statistical test at a P < 0.05 level.
ResultsQuantitative data comparison of this research indicated that harmine and a low-frequency electromagnetic field with an intensity of 50 Gauss caused a concentration-dependent reduction in the viability of ovarian cancer cells. Additionally, in the nitric oxide test, a significant decrease was found in the control group compared to the groups treated with a concentration of 48 micromolar and synergized with a 50 Gauss electromagnetic field (p<0.05). The expression of the aforementioned genes in treated cells showed a significant decrease. Treating ovarian cancer cells with harmine and its combined application led to significant nuclear morphological changes, including chromatin condensation, formation of apoptotic bodies, and wrinkling of the cell membrane.
ConclusionsThe combined application of harmine and a low-frequency electromagnetic field induced apoptosis in A2780 cancer cells and resulted in the downregulation of COX2, VEGF-A, and MMP-2 gene expression. Consequently, the combined use of harmine with a low-frequency electromagnetic field, due to its effective cytotoxicity in inhibiting proliferation and inducing apoptosis, could be a suitable candidate for clinical studies.
Keywords: A2780 Cell Line, Harmine, Electromagnetic Field -
هدف:
در مطالعه حاضر، تغییرات سطح بیان ژنهای کلاژن، اگریکان و فاکتور نکروز دهنده تومور- آلفا در سلولهایNP التهابی تیمار شده با اگزوزوم و اثربخشی اگزوزوم بر کاهش آپوپتوزیس سلولهایNP ملتهب بررسی شد.
مواد و روش ها:
اگزوزومها با روش اولتراسانتریفیوژ جداسازی و با کمک میکروسکوپ الکترونی عبوری، میکروسکوپ نیروی اتمی و روش پراکندگی نور پویا شناسایی شدند. زیستایی سلولها با آزمون MTTو رنگآمیزی DAPI مورد بررسی قرار گرفت. سنجش بیان ژنهای کلاژن، اگریکان و TNF-α با روش Real-time PCR صورت گرفت.
نتایج:
MSC-Exo، وزیکول هایی با قطر 5/35 تا 100 نانومتر میباشند. بر اساس آزمون MTT، میزان زیستایی سلولهای ملتهب تیمار شده با اگزوزوم تفاوت معناداری نسبت به گروه التهابی بدون تیمار داشت(05/0*P< در دوز 100 میکروگرم بر میلیلیتر، 01/0**P< دوزهای 25 و 50 میکروگرم بر میلیلیتر). نتایج DAPI نشاندهنده کاهش آپوپتوزیس در گروه تیمار شده با اگزوزوم بود. نتایج Real time PCR، افزایش بیان ژنهای کلاژن (05/0*P<) و اگریکان (001/0***P<) و کاهش بیان ژن TNF-α(01/0**P<) در سلولهای التهابی تیمار شده با اگزوزوم را نشان داد.
نتیجه گیری:
اگزوزومهای مشتق از سلولهای بنیادی مزانشیمی میتوانند باعث افزایش بیان ژنهای کلاژن و اگریکان و کاهش بیان ژن TNF-α در سلولهای تیمار شده شوند و لذا ضرورت مطالعات کلینیکی کمردرد کاملا محسوس و پیشنهاد میشود.
کلید واژگان: سلول های نوکلئوس پولپوزوس، اگزوزوم های مشتق از سلول های بنیادی مزانشیمی، کلاژن، اگریکان، فاکتور نکروز دهنده تومور- آلفاAimLow back pain (LBP) is one of the most common musculoskeletal diseases in the world. Apoptosis of nucleus pulposus (NP) cells and structural changes in the intervertebral disc (IVD) matrix cause its degeneration and are directly related to LBP. Because of exosomes derived from mesenchymal stem cells (MSC-Exo) are high therapeutic potential and may be valuable options for decreasing intervertebral disc degeneration (IDD).
The present study evaluates changes in the expression level of genes responsible for repairing NP cells (collagen and aggrecan) and tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) gene and the effectiveness of exosomes in inhibiting excessive apoptosis of NP cells under inflammation.Material and MethodsExosomes were separated by ultracentrifuge. They were identified with the help of transmission electron microscopy (TEM), atomic force microscope (AFM), and dynamic light scattering (DLS). Cell viability was evaluated by MTT assay and DAPI staining. Real-time PCR measured the expression of collagen, aggrecan, and TNF-α genes.
ResultsExosomes are vesicles with a diameter of about 35.5 to 100 nm. Based on the findings of the MTT assay, the survival rate of the inflammatory cells treated with exosomes was significantly different from the inflammation group without treatment (*P<0.05 at the dose of 100 μg/ml, **P<0.01 at the doses of 25 and 50 μg/ml). DAPI results showed a decrease in cell death in the exosome-treated group. Real-time PCR results showed increased expression of collagen (*P<0.05) and aggrecan (***P<0.001) genes and decreased the TNF-α (**P<0.01) gene in inflammatory cells treated with exosomes.
ConclusionExosomes derived from mesenchymal stem cells can increase collagen and aggrecan gene expression and decrease TNF-α gene expression in treated cells.
Keywords: Nucleus pulposus cells, Exosomes derived from mesenchymal stem cells, Collagen, Aggrecan, Tumor necrosis factor-alpha -
Objective
In recent years, in vitro maturation (IVM) has become the focus of fertility maintenance, and infertility treatment. The aim of this study is development of oocytes during folliculogenesis and oogenesis is greatly influenced by the presence of BMP-7, BMP-15, and GDF-9 genes, which are present in exosomes generated from bone marrow stem cells.
Materials and MethodsIn the experimental study, we investigated how exosomes obtained from bone marrow stem cells affected development and expansion of ovarian granulosa cells (GCs) in NMRI mice. In this in vitro experiment, bone marrow stem cells were isolated from mice’s bone marrow, and after identification, exosomes were recovered. Exosome doses of 100, 50, and 25 μg/ml were applied to GCs before using MTT assay to measure survival rates and quantitative reverse-transcription polymerase chain reaction (PCR) to measure expression of the BMP-7, BMP-15, and GDF-9 genes.
ResultsThe results showed that the GCs treated with exosomes concentrations of 25, 50, and 100 μg/ml significantly increased bioavailability, growth and proliferation and it also increased expression level of BMP-7, BMP-15 and GDF-9 genes compared to the controls.
ConclusionFindings of this study indicated that exosomes derived from bone marrow stem cells improved growth of GCs in NMRI mice and they were a good candidate for further clinical studies to improve quality of the assisted reproductive techniques.
Keywords: Annexin, Exosomes, Granulosa Cells, Stem Cells -
هدفهدف بررسی اثرات سمیت سلولی پاکلی تاکسل و اگزالی پلاتین بر رده سلولی سرطان کولون (HT29) و آنالیز بیان ژن های آپوپتوزی کاسپاز 3، 9و P53 می باشد.مواد و روش هاابتدا سمیت سلولی داروهای پاکلی تاکسل و اگزالی پلاتین و اثر توام آنها با غلظت های مختلف بر رده سلولی HT29 با روش MTT بررسی شد و غلظت 50 درصد کشندگی (IC50) آن تعیین شد. میزان بیان ژنهای آپوپتوزی کاسپاز 3 و 9 نسبت به ژن مرجع GAPDH با استفاده از روش Real-Time PCR بررسی شد. هم چنین بررسی آپوپتوز سلول ها با استفاده از رنگ آمیزی Annexin V/PI و DAPI انجام شد. نتایجپاکلی تاکسل و اگزالی پلاتین به ترتیب در غلظت های 25/3 و 00062/0 میکروگرم در میلیلیتر بیشترین اثر سمیت سلولی را دارد و میزان IC50 آن 00016/0 و µg/ml 5/12 محاسبه شد. تیمار همزمان داروها زنده مانی سلول ها را کاهش داد . بیان ژنهای کاسپاز 3 و 9, P53 نسبت به ژن مرجع GAPDH در سلول های سرطان کولون تیمار شده نیز افزایش یافت. نتایج آزمون DAPI نشان دهنده ی قطعه قطعه شدن هسته ها و آپوپتوز در گروه های تیماری همزمان بود. بررسی آپوپتوز با استفاده از Annexin V/PI نشان می دهد که 98 درصد سلول های گروه شاهد سالم می باشند و درصد زیادی از سلول ها تحت تیمار دچار آپوپتوز شده اند . نتیجه گیریبا توجه به سمیت سلولی و القای فرایند آپوپتوزیس در رده سلولی سرطان کولون توسط داروهای پاکلی تاکسل و اگزالی-پلاتین، میتوان نتیجه گیری کرد که این داروها گزینه مناسب جهت درمان سرطان کولون می باشند.کلید واژگان: اگزالی پلاتین، پاکلی تاکسل، سرطان کولون، ژن کاسپاز، ژن p53AimIn this study the effects of paclitaxel and oxaliplatin on colon cancer cell line (HT29) and expression of apoptotic genes caspase 3, 9, and p53 were examined.Material and methodsUsing the MTT method, the cytotoxicity of paclitaxel and oxaliplatin and synergic effect at different concentrations on the HT29 cell line was assessed. The IC50 of paclitaxel and oxaliplatin was determined.The expression level of caspase 3 and 9 was assessed using the Real-Time PCR method after the cells had been exposed to the IC50 concentration. Apoptosis of the cells was done using Annexin V/PI and DAPI staining.ResultsThe treatment of cells revealed that paclitaxel and oxaliplatin at concentrations of 3.25 and 0.00062 µg/ml , respectively, have the most cytotoxic effects and its IC50 value was determined to be 12.5 µg/ml and 0.00016 and treatment groups at concentrations of 3.25 and 0.00062 µg/ml , respectively, decreased the cell viability and its IC50 value was determined to be 12.5 µg/ml and0.00016µg/m. The expression level of caspase 3 and 9 P53 was also increased in the treated colon cancer cell line. DAPI staining showed apoptosis in the simultaneous treatment groups with. Using Annexin V/PI reveals that 98 percent of the cells in the control group are healthy and a considerable number of the cells in the treated groups have undergone apoptosis.ConclusionIs. It is clear that paclitaxel and oxaliplatin are effective options for treating colon cancer given their cytotoxicity and stimulation of the apoptotic process in colon cancer cell lines.Keywords: Oxaliplatin, Paclitaxel, Colon cancer, caspase gene, P53 Gene
-
Objectives
This study aimed to evaluate the effect of anthocyanin on oxidative stress, sperm, and testis structure in diabetic rats induced by streptozotocin (STZ).
Materials and MethodsIn this experimental research, diabetes was induced by a single intraperitoneal injection of STZ (50 mg/kg). A total of 64 rats were assigned into four groups as follows: a control group, a diabetic control group, a diabetic group daily administrated with anthocyanin at a dose of 100 mg/kg, and a healthy group daily administrated with anthocyanin for 56 days. After intervention, all the rats were anesthetized, their blood samples were taken, and the serum levels of insulin, glucose, and oxidative stress markers were measured. Finally, the testicles were removed and histological parameters were assessed.
ResultsTreating diabetic rats with anthocyanin significantly improved the testis tissue damage, glucose, and insulin plasma levels (P = 0.001). Furthermore, the level of malondialdehyde (MDA) was up-surged and the serum levels of superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) were reduced (P = 0.001). Also, anthocyanin administration (100 mg/kg BW) significantly rectified these parameters (P < 0.05).
ConclusionsOur results confirmed the antioxidant role of anthocyanin in improving the sperm parameters and testicular oxidative damage caused by diabetes.
Keywords: Anthocyanin, Testis, Oxidative stress, Diabetes -
Glutamine (Gln) is an essential amino acid with a wide range of cellular functions and is necessary for cell proliferation. It is usually added to the culture media in the form of L-glutamine, which is highly unstable and degrades in a temperature-dependent manner during the culture period. Although, Gln is beneficial for the cells, its degradation produces ammonia which is toxic and negatively affect cell culture. Pheochromocytoma cells (PC-12), originating from cancerous cells of the rat adrenal gland, are considered as a suitable model to study the differentiating effects of different factors. Previous studies showed the importance of Gln in the normal growth and differentiation of the cells. Alginate, is one of the biomaterials currently used as a natural scaffold for the induction of neuronal differentiation. In the present experimental research, the effect of stable and elevated levels of Gln on the growth and neuronal differentiation of PC-12 cells was compared under 2D- and 3D- (sodium alginate hydrogel beads) culture conditions. The cells’ viabilities were determined and compared between experimental groups using live/dead cell staining by Acridine orange/Propidium iodide (AO/PI), and the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) test. Furthermore, cells were stained using cresyl violet to detect neuronal Nissl bodies. The induction of differentiation was confirmed using immunocytochemical analysis of Nestin and β-tubulin III proteins and Cells’ nuclei were counterstained with 4′,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI). Results showed that high concentration of Gln can induce neuronal differentiation in PC-12 cells under both 2D- and 3D- culture conditions and increases the expression of progenitor and mature neuronal markers Nestin and β-tubulin III, respectively.
Keywords: Neural Differentiation, Glutamine, PC-12 cells, alginate -
هدف
سرطان پانکراس یکی از کشنده ترین سرطان های مربوط به سیستم دستگاه گوارش در جهان محسوب می شود. با توجه به افزایش مقاومت سلول های سرطانی به شیمی درمانی و عوارض جانبی آن، نیاز به داروهایی با عوارض جانبی کمتر و همچنین دارای منشا طبیعی احساس می شود.
روش هادر این تحقیق تجربی به بررسی اثر هارمین و استفاده توام آن با فلورویوراسیل برای القای آپوپتوز در سلول های سرطانی پانکراس، رده سلولی AsPC-1 پرداخته شد. برای مطالعه اثرات سایتوتوکسیک از روش رنگ سنجی و سمیت سلولی برای بررسی تعیین نوع مرگ سلولی از روش رنگ آمیزی (4,6-Diamidino-2-phenylindole dihydrocholoride) DAPI و تست Annexin V/ PI (Annexin-V Propidium Iodide) استفاده شد. میزان بیان ژن های آپوپتوزی P53, BAX, Caspase-3 و Caspase-9 با روش Real time-PCR اندازه گیری شد. داده ها با روش آماری (آزمون واریانس یک طرفه آنووا) در سطح معناداری 0/05
یافته هایافته های حاصل از روش MTT نشان داد کاربرد توام هارمین با غلظت 20 میکروگرم بر میلی لیتر و فلورویوراسیل با دز 10 میکروگرم بر میلی لیتر سبب کاهش رشد (05/IC50, P<0) رده AsPC-1 شد. نتایج به دست آمده از رنگ آمیزی DAPI و تست انکسین القای آپوپتوز را در نمونه های تحت آزمایش نشان داد. همچنین نتایج تست ریل تایم نیز نشان داد بیان ژن های ،P53 کاسپاز 3،BAX و کاسپاز 9 در گروه های آزمایش نسبت به گروه کنترل افزایش معنادار است.
نتیجه گیرینتایج نشان داد کاربرد هم زمان هارمین و فلورویوراسیل به دلیل داشتن سیتوتوکسیسیته بالا باعث القای آپوپتوز در سلول های سرطانی پانکراس و کاهش غلظت مصرفی داروی شیمی درمانی می شود. بنابراین می توان آن را به عنوان کاندیدایی جهت همراهی با داروی سرطان پیشنهاد کرد.
کلید واژگان: سرطان پانکراس، هارمین، فلورویوراسیل، کاسپازComplementary Medicine Journal of faculty of Nursing & Midwifery, Volume:12 Issue: 2, 2022, PP 172 -187ObjectivePancreatic cancer is one of the deadliest cancers related to the digestive system in the world. Due to the increasing resistance of cancer cells to chemotherapy and its side effects, there is a need for drugs with fewer side effects and natural origin. In this study, the effect of harmine combined with fluorouracil on apoptosis induction in pancreatic cancer cells (AsPC-1) and the expression of apoptotic genes was investigated.
MethodsIn this experimental study, MTT assay was used to study the cytotoxic effects. Annexin V/propidium iodide test and DAPI staining method were used to determine the type of cell death. The expression of apoptotic genes (P53, Bax, Caspase-3, and Caspase-9) was measured by real-time PCR. The data were analyzed using one-way ANOVA in SPSS software, version 16. The significance level was set at 0.05.
ResultsThe results of MTT assay showed that the use of harmine at 20 μg/mL concentration combined with 10 μg/mL fluorouracil significantly reduced the growth (IC50) of AsPC-1 cells. The results of DAPI staining and annexin V/propidium iodide test showed the induction of apoptosis in treated samples. In addition, the results of real-time PCR showed that the expression of BAX, P53, Caspase-3 and Caspase-9 genes increased in the treated groups compared to the control group.
ConclusionThe combined use of harmine and fluorouracil can induce apoptosis in pancreatic cancer cells due to high cytotoxicity and reduce the concentration of chemotherapy drugs. Therefore, this method can be used along with other treatment methods for pancreatic cancer.
Keywords: Pancreatic Neoplasms, Harmine, Fluorouracil, Caspases -
سرطان تخمدان بالاترین موارد مرگ و میر را در بین همه بدخیمی های دستگاه تناسلی زنان دارد. این سرطان ششمین سرطان در کشورهای غربی و رتبه هشتم سرطان در زنان ایرانی است که در مراحل اولیه حتی مراحل بالاتر هیچگونه علامتی ندارد. یکی از ژن هایی که در این سرطان بیان زیادی دارد و مهار آن باعث افزایش پاسخ به درمان می شود ژن Cox است. لذا هدف از این مطالعه بررسی سرطان تخمدان در مراحل اولیه، بررسی بیان ژن Cox و آنزیم های SGPT و SGOT و همچنین بررسی تیمار غلظت های مختلف عصاره گیاه گزنه است. در این مطالعه تجربی عصاره هیدروالکلی ساقه، برگ و ریشه گیاه گزنه تهیه و دوزهای 75 و 250 میلی گرم برکیلوگرم وزن بدن آماده گردید. جهت القا سرطان تخمدان در موش کوچک آزمایشگاهی از ماده DMBA استفاده گردید. پس از 28 روز برای سنجش مقدار آنزیم خونگیری انجام شد. سپس بافت تخمدان جداسازی، توزین و از لحاظ مرفولوژی با سایر اندام ها مقایسه گردید. استخراج RNA، نانودراپ، الکتروفورز، سنتز cDNA، و بررسی بیان ژن انجام شد. نتایج توسط نرم افزار SPSS مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج سنجش آنزیم SGOT نشان داد تیمارهای R250 و S75 و T2 دارای تغییرات معنی داری هستند. حد نرمال بیان ژن Cox مربوط به شاهد آزمایشگاهی (63/1) بوده و کمترین میزان بیان ژن مربوط به تیمار S75 در روز 28ام و بیشترین میزان بیان مربوط به R75 در همان روز است. بنابراین به نظر می رسد تغییرات بیان ژن Cox و آنزیم SGOT می تواند به عنوان مارکری جهت تشخیص زودرس سرطان تخمدان مورد استفاده قرار گیرد.
کلید واژگان: سرطان تخمدان، ژن Cox، آنزیم SGOT، گیاه گزنهOvarian cancer has the highest mortality rate among all genital malignancies. It is the sixth cancer in the western world that has no symptoms at all in the early stages. One of the genes that is highly expressed and inhibited in cancer is the Cox gene. The aim of this study was to evaluate ovarian cancer in early stages, evaluation of Cox gene expression and SGPT and SGOT enzymes, and also investigated the treatment of different concentrations of nettle extract. In this experimental study, hydroalcoholic extract of nettle leaf, stem and root was prepared and doses of 75 and 250 mg/kg body weight were prepared. DMBA was used to induce ovarian cancer in mice. Blood samples were taken after 28 days to measure enzyme levels. Ovarian tissue was then separated, weighed and morphologically compared with other organs. RNA extraction, nanodrape, electrophoresis, cDNA synthesis, and gene expression analysis were performed. The results were evaluated by SPSS software. The results of SGOT enzyme assay showed that R250, S75 and T2 treatments had significant changes. The normal expression level of Cox gene was in the laboratory control (1.63) and the lowest gene expression was related to S75 treatment on day 28 and the highest expression was related to R75 on the same day. Cox gene expression changes and the SGOT enzyme can be used as a marker for early detection of ovarian cancer.
Keywords: Ovarian Cancer, Cox Gene, SGOT Enzyme, Urtica dioica L -
سرطان معده دومین علت مرگ ناشی از سرطان در جهان به شمار می رود. Artemisia absinthium از گونه های مهم گیاهان جنس Artemisia است که دارای خواص ضدالتهابی و ضدویروسی است. در مطالعه حاضر توانایی عصاره متانولی A. absinthium به تنهایی و در ترکیب با تاکسول بر روی القای آپوپتوز و مهار مهاجرت سلولی در رده سلولی AGS (دودمان سرطان معده انسانی) بررسی شده است. برای بررسی اثر سیتوتوکسیک کاربرد توام عصاره A. absinthium با تاکسول بر روی تکثیر سلول های AGS از آزمون MTT استفاده شد؛ جهت بررسی آپوپتوز در سلول های تحت تیمار از رنگ آمیزی DAPI و آنالیز فلوسایتومری و برای بررسی اثر ضد تهاجمی از تست مهاجرت سلولی استفاده شد؛ تغییرات در میزان بیان ژن های آپوپتوزی "p53 - Caspase-3,9" و متاستازی "MMP-2,9" با تکنیک Real-time PCR بررسی شد. داده های کمی حاصل توسط آزمون آماری "ANOVA" در سطح معنی-داری "p< 0.05" تحلیل گردید. نتایج حاصل از آزمون MTT نشان داد که ترکیب عصاره A. absinthium با تاکسول تکثیر سلول های سرطانی AGS را به صورت وابسته به غلظت مهار می کند، مشاهدات مورفولوژیک حاصل از روش DAPI و نتایج فلوسایتومتری نشان دهنده افزایش درصد سلول های آپوپتوتیک در گروه های تیماری بود؛ نتایج تست مهاجرت سلولی کاهش پتانسیل تهاجمی سلول های AGS را نشان داد. نتایج Real-time PCR بیان گر افزایش بیان ژن-های آپوپتوزی و کاهش ژن های متاستازی در گروه های تیماری بود. نتایج حاصل از این پژوهش نشان داد که کاربرد توام عصاره A. absinthium با تاکسول، تکثیر سلول های رده AGS را مهار می کند و باعث القای آپوپتوز و مهار توانایی مهاجرت در این سلول ها می شود.کلید واژگان: سرطان معده، Artemisia absinthium، تاکسول، آپوپتوز، متاستازGastric cancer is the second leading cause of cancer death worldwide. Artemisia absinthium is one of the genus Artemisia which has anti-inflammatory and anti-viral properties. In the present study investigated the ability of methanolic extract of A. absinthium alone and in combination with Taxol to induce apoptosis and inhibited cell migration in the AGS cell line. Investigating cytotoxic effect of combined A. absinthium extract with Taxol on the proliferation of AGS cells, were used MTT assay; DAPI staining and flow cytometry analysis were used to evaluate the ability to induce apoptosis in treated cells and cell migration test was used to evaluate the anti-invasive effect; Changes in the expression of apoptotic "p53-Caspase-3,9" and metastasis genes "MMP-2,9" were examined by real-time PCR. The MTT results showed that the combination of A. absinthium extract with Taxol inhibited the proliferation of AGS cells in a concentration-dependent manner, Morphological observations obtained from DAPI and results of flow cytometry showed an increase in the percentage of apoptotic cells in the treatment groups. The results of cell migration test showed a decrease in the invasive potential of AGS cells. The real-time PCR results showed an increase in the expression of apoptotic genes and a decrease in the expression of metastatic genes in the treatment groups. The results of this study showed that the combined use of A. absinthium extract with Taxol inhibits the proliferation of AGS cells and induces apoptosis and inhibits the ability to migrate.Keywords: gastric cancer, Artemisia absinthium, Taxol, Apoptosis, Metastasis
-
Background
Melanoma is the most serious kind of skin cancer which has significantly increased in recent decades, and the importance of its primary treatment is increased widely. Ficus carica leaves have various therapeutic impact such as anti-inflammatory, anti-proliferative and apoptotic activity.
ObjectivesHence, regarding the F. carica effect on the treatment of various diseases, the present research was conducted to identify the effect of methanolic extract of F. carica leaf on apoptosis induction in B16F10 melanoma cancer cells.
MethodsCell survival was estimated by MTT assay after treatment of B16F10 cells in various concentrations of F. carica leaf extract (150, 250, 350, 450, 550, 650, 750 and 850 µg /mL) for 24 and 48 h. Cell apoptosis was analysed by AO/PI and DAPI staining, Annexin V/Propidium Iodide flow cytometry. Moreover, Real-time PCR was utilized to evaluate the expression of apoptotic genes including p53, Bax, caspase-3 and caspase-9 genes.
ResultsMTT assay results indicated that methanolic extract of F. carica leaf prevented the proliferation of B16F10 cells in a dose and time dependent manner. AO/PI staining results showed an elevation in apoptotic cells in treated groups and DAPI indicated that F. carica extract resulted in chromatin condensation and fragmentation. Annexin V revealed the increasing percentage of apoptotic cells after treatment. In addition, the up-regulation of apoptotic genes confirmed the apoptosis inducing potential of F. carica leaves in B16F10 cells by Real-time PCR.
ConclusionsThus, methanolic extract of F. carica leaves could be suggested as an effective anti-cancer agent for further studies on melanoma cancer.
Keywords: Ficus carica, Melanoma Cancer, Anti-proliferative, Apoptosis, Cytotoxicity -
سابقه و هدف
سرطان ریه شایع ترین علت مرگ ناشی از سرطان در سراسر جهان است. بربرین یک آلکالویید گیاهی و دارای خواص آنتی اکسیدانی، ضدسرطانی و ضدتوموری می باشد. سیس پلاتین یک القاکننده قوی آپوپتوز در اکثر انواع سلول های سرطانی می باشد. در مطالعه حاضر توانایی بربرین به تنهایی و در ترکیب با سیس پلاتین بر القای آپوپتوز در رده سلولی Calu-6 (دودمان سرطان ریه انسانی) مورد بررسی قرار گرفته است.
مواد و روش هادر این پژوهش تجربی برای بررسی اثرات سیتوتوکسیک ترکیب توام بربرین با سیس پلاتین بر تکثیر سلول های Calu-6 از آزمون MTT استفاده شد؛ جهت بررسی آپوپتوز در سلول های تحت تیمار از رنگ آمیزی DAPI و آزمون Annexin V-FITC استفاده شد؛ تغییرات در سطح بیان نسخه رونوشت ژن های BAX, Caspase 3,9, p53 با تکنیک Real-time PCR ارزیابی شد. داده های کمی حاصل توسط آزمون آماری واریانس یک طرفه ANOVA در سطح معنی داری 0/05<P تحلیل گردید.
نتایجنتایج حاصل از آزمون MTT نشان داد که ترکیب بربرین با سیس پلاتین، تکثیر سلول های Calu-6 را به صورت وابسته به غلظت و زمان، مهار می کند، مشاهدات مورفولوژیک حاصل از روش DAPI و نتایج آزمون Annexin V-FITC نشان دهنده افزایش سلول های آپوپتوتیک در گروه های تیماری بود. نتایج Real-time PCR نشان دهنده افزایش بیان نسخه رونوشت ژن های BAX, Caspase 3,9, p53 در گروه های تیماری بود.
نتیجه گیرینتایج حاصل از این پژوهش نشان داد که کاربرد توام بربرین همراه با سیس پلاتین، تکثیر سلول های Calu-6 را مهار می کند و باعث القای آپوپتوز در این سلول ها می شود.
کلید واژگان: سرطان ریه، آپوپتوز، بربرین، سیس پلاتین، رده سلولی Calu-6Feyz, Volume:25 Issue: 6, 2022, PP 1275 -1285BackgroundLung cancer is the most common cause of cancer death worldwide. Berberine as a herbal alkaloid has antioxidant, anti-cancer and anti-tumor properties. Cisplatin is a potent inducer of apoptosis in most types of cancer cells. In the present study, investigated the ability of berberine alone and in combination with cisplatin to induce apoptosis in the Calu-6 cell line (human lung cancer cell line).
Materials and MethodsIn this experimental study, MTT assay was used to evaluate the cytotoxic effects of combination of berberine with cisplatin on Calu-6 cell proliferation; DAPI staining and annexin V-FITC assay were also used to evaluate apoptosis in treated cells; changes in the level of transcripts of BAX, Caspase 3,9, p53 genes were examined by real-time PCR. Quantitative data were analyzed by one-way ANOVA at a significant level of P<0.05.
ResultsThe MTT assay results showed that the combination of berberine with cisplatin inhibits the proliferation of Calu-6 cells in a concentration- and time-dependent manner. Morphological observations obtained from DAPI staining method and annexin V-FITC assay showed an increase in apoptotic cells in the treatment groups. The real-time PCR results showed an increase in the expression of transcripts of BAX, Caspase 3,9, p53 genes in the treatment groups.
ConclusionThe results of this research showed that the concomitant use of berberine with cisplatin inhibits the proliferation of Calu-6 cells and induces apoptosis in these cells.
Keywords: Lung cancer, Apoptosis, Berberine, Cisplatin, Calu-6 cell line -
سابقه و هدف
سرطان همچنان مهم ترین علت مرگ بعد از بیماری های قلب و عروق و سوانح است. امروزه تلاش محققین برای بهره گیری از درمان هایی با حداقل عوارض جانبی و استفاده از طب سنتی و داروهای گیاهی بیشتر شده است. عنبرنسارا ماده ای به ظاهر بی ارزش جای خود را در طب سنتی پیدا کرده و در درمان بسیاری از بیماری ها کاربرد دارد. این مطالعه باهدف ارزیابی اثرات ضد سرطانی دود حاصل از سوختن عنبرنسارا، روی سلول های سرطانی کبد و بررسی تغییرات بیان ژن های P53 و CYP2E1 انجام شد.
مواد و روش هادر این مطالعه تجربی ابتدا عنبرنسارا از منطقه درگز، در فصل بهار، جمع آوری و سپس دود حاصل از سوخت آن در پروپیلن گلیکول سرد جمع آوری گردید. مقدار دود در حلال محاسبه گردید. رده سلولی سرطان کبد (HEPG2) و رده سلولی نرمال کشت گردید. تست سمیت سلولی و مطالعات مرفولوژی انجام و مقدار IC50 محاسبه شد. جهت بررسی میزان بیان ژن های P53 و CYP2E1، استخراج RNA، سنتز cDNA و Real Time PCR انجام شد. نتایج توسط آزمون های آماری t-test و ANOVA در سطح معناداری (P<0.05) آنالیز گردید.
یافته هانتایج بررسی های مرفولوژیکی و تست سمیت بیانگر آن است که دود حاصل از سوخت عنبرنسارا در غلظت 5/58 میلی گرم در میلی لیتر سبب افزایش مرگ و میر سلول های سرطانی (IC50=48.79) در مقایسه با گروه شاهد می گردد (P<0.05). در بررسی بیان ژن درحالیکه غلظت 117 میلی گرم باعث افزایش بیان ژن CYP2E1 شد، ژن P53 در غلظت 5/58 افزایش نشان داد (P<0.05).
نتیجه گیریبه نظر می رسد دود حاصل از سوختن عنبرنسارا دارای اثر کشندگی بر سلول های سرطانی کبد می باشد. مدت زمان و غلظت در این اثربخشی موثر است.
کلید واژگان: رده سلولی HepG2، عنبرنسارا، ژن P53، ژن CYP2E1Background & AimCancer is the leading cause of death after cardiovascular diseases, and accidents. Nowadays, researchers are increasing their efforts to use treatments with minimal side effects and make an attempt to use traditional medicine and herbal remedies. AnbarNesara is a seemingly worthless substance found in traditional medicine used in the treatment of many diseases. The aim of the present study was to evaluate the cytotoxic effects of the smoke from the burning of AnbarNesara on liver cancer cells and to investigate the genes expression changes of P53 and CYP2E1.
Materials and MethodsIn the current experimental study, first Anbarnsara was collected from Dargaz region in spring and then the smoke from its fuel was collected in cold propyleneglycol. The amount of smoke in the solvent was calculated. Then, liver cancer cell line (HEPG2) and normal cell line were cultured. Cytotoxicity tests and morphological studies were performed and IC50 value was calculated. RNA extraction, cDNA synthesis, and Real Time PCR were performed to evaluate the expression of P53 and CYP2E1 genes. The results were analyzed using t-test and ANOVA at a significance level of P <0.05.
ResultsThe results of morphological studies and toxicity test indicated that smoke from AnbarNesara fuel at a concentration of 58.5 mg/ml increases cancer cell mortality (IC50=48.79) compared to that in the control group (P <0.05). In the study of gene expression, while the concentration of 117 mg increased the expression of CYP2E1 gene, the P53 gene increased at the concentration of 58.5 (P <0.05).
ConclusionThe smoke from burning Anbarnsara seems to have a lethal effect on liver cancer cells. Duration and concentration are significant in this effectiveness.
Keywords: HepG2 Cell Line, AnbarNesara, P53 gene, CYP2E1 gene -
Journal of Pediatric Perspectives, Volume:9 Issue: 94, Oct 2021, PP 14540 -14548BackgroundIn children with lymphoblastic leukemia (ALL), cancerous metastasis to the central nervous system (CNS) is common, but there is insufficient information on this metastasis and cancer progression process. Further, the role of exosomes on cancer growth and metastasis has been the attention of many studies. Because the astrocytes involve in the blood-brain barrier and stay in contact with peripheral blood , we investigated the effect of exosomes derived Nalm6 cell line on astrocytes from human brain fetal tissue.MethodsIn this in vitro study, exosomes were isolated from the supernatant of Nalm6 cell line by centrifugation and identified by DLS, AFM and FE-SEM methods. Astrocytes were isolated from human fetal brain tissue cells and expanded and identified by GFAP antibody with immunocytochemistry. Astrocytes were treated with different concentrations of exosomes (i.e., 5, 10, 30, and 50 µg/ml),. Proliferation and migration were assessed with Trypan blue staining and scratch methods, respectively. To define tumorogensis changes in astrocytes treated by exosomes, the expression of MMP9, P53, and Cox2 genes were investigated by Real-Time PCR.FindingsAccording to the DLS results, the size of exosomes was about 43 nm. AFM and FE-SEM imaging indicated these exosomes have a spherical shape. Our results showed that the proliferation of astrocytes significantly increased when treated with 50 µg/ml of exosomes.Therefore, the concentration of 50 µg/ml was considered for further experiments. Astrocyte migration was significantly increased compared to the control group. Finally, our results showed tumorogenesis changes in astrocytes by increasing the expression of MMP9 and Cox2 and decreasing the expression of p53 at mRNA level.ConclusionBased on our in vitro study, exosomes derived from ALL as a peripheral tumor can change the behavior of astrocytes as a target for metastasis. Further investigations on this topic are warranted to shed light on metastatic mechanisms.Keywords: Leukemia, Exosome, Astrocyte, Tumorigenesis
-
Background
Ovarian cancer is the leading cause of death caused by genital cancers. One of the most common treatments for this type of cancer is chemotherapy by cisplatin, which induces apoptosis in cancer cells. Apoptosis is a type of physiological cell death. Cisplatin chemotherapy usually has several side effects and cellular resistance to cisplatin is a common incidence. In order to overcome these problems, the use of combination therapies using natural substances has been considered. Fisetin is a flavonoid with anti-cancer activity which induces apoptosis</span>. In this study, the apoptosis induced by cisplatin along with Fisetin in cisplatin-resistant ovarian cancer cell line (A2780) was investigated.
MethodsIn the present experimental study, the effect of combined use of Fisetin and cisplatin on ovarian cancer cell lines (A2780) was investigated by using MTT assay. Cell death was also determined by DAPI, acridine orange/propidium iodide, and Annexin/PI assay. Apoptotic gene expression of Bax</em>, BCL-2</em>, caspase 3</em>, and caspase 9</em> was also assessed by real time PCR.
ResultsThe results of MTT assay indicated that the combined treatment of Fisetin and cisplatin effectively inhibits proliferation of A2780 cells. The results of DAPI staining showed that fragmentation of chromatin in cells occurred in the combined treatment. Acridine orange-propidium iodide staining and Annexin/PI staining showed an increase in the rate of apoptotic cells in cells under combined treatment. The results of the study regarding changes in gene expression also indicated that Bax</em> pro-apoptotic gene expression and BCL-2</em> anti-apoptotic gene expression increased in cells under treatment; moreover, gene expression of caspases 3</em> and 9</em> significantly increased as well.
ConclusionAccording to the findings of this study, the combined use of cisplatin and Fisetin increases the induction of apoptosis in cisplatin-resistant ovarian cancer cells (A2780); therefore, the combined use of cisplatin and Fisetin can be considered a promising </span>strategy</span> in the treatment of ovarian cancer.
Keywords: Apoptosis, Cisplatin, Fisetin, Ovarian neoplasms -
پیش زمینه و هدف
سرطان تخمدان سومین سرطان شایع در میان زنان هست. گیاهان جنس Artemisia یکی از پرکاربردترین گیاهان دارویی می باشند؛ Artemisia absinthium از گونه های مهم این جنس است. مطالعه حاضر باهدف ارزیابی اثر سمیت سلولی و توانایی القای آپوپتوز عصاره متانولی A. absinthium در دودمان سلولی A2780 (سرطان تخمدان انسانی) انجام گردید.
مواد و روش کار:
در این پژوهش تجربی-آزمایشگاهی پس از تهیه عصاره متانولی A. absinthium برای بررسی اثرات سیتوتوکسیک عصاره A. absinthium بر روی تکثیر سلو ل های سرطانی رده A2780 از آزمون MTT استفاده شد؛ برای بررسی توانایی القای آپوپتوز در سلول های تحت تیمار با عصاره A. absinthium از روش های رنگ آمیزی DAPI و آنالیز فلوسایتومری استفاده شد؛ تغییرات در میزان بیان ژن های آپوپتوزی "BAX, Caspase 3,9, p53" با فن Real-time PCR بررسی شد. داده های کمی حاصل توسط آزمون آماری "ANOVA" در سطح معنی داری "p< 0.05" تحلیل گردید.
یافته ها:
نتایج حاصل از آزمون MTT نشان داد که عصاره متانولی A. absinthium، تکثیر سلول های سرطانی A2780 را به صورت وابسته به غلظت (***001/0>p) مهار می کند، مشاهدات مورفولوژیک حاصل از روش DAPI و نتایج آنالیز فلوسایتومتری نشان دهنده افزایش درصد سلول های آپوپتوتیک در گروه های تیماری بود. بررسی نتایج Real-time PCR نشان دهنده افزایش بیان ژن های آپوپتوزی "BAX, Caspase 3,9, p53" در سطح معنی داری (**01/0>p) و (***001/0>p) در گروه های تیماری بود.
بحث و نتیجه گیری:
نتایج حاصل از این پژوهش نشان داد که عصاره متانولی A. absinthium، تکثیر سلول های سرطانی رده A2780 را مهار می کند و باعث القای آپوپتوز در این سلول ها می شود.
کلید واژگان: سرطان تخمدان، آپوپتوز، Artemisia absinthiumBackground & AimsOvarian cancer is the third most common cancer in women. Artemisia is one of the most commonly used medicinal plants, and Artemisia absinthium is one of the important species of this genus. The aim of this study was to evaluate the effect of cytotoxicity and the ability to induce apoptosis methanolic extract of A. absinthium in A2780 cell line (human ovarian cancer).
Materials & MethodsIn this experimental study, methanolic extract of A. absinthium was prepared. MTT assay was used to evaluate the cytotoxic effects of A. absinthium extract on A2780 cancer cell proliferation and DAPI staining and flow cytometry analysis were used to evaluate the ability to induce apoptosis in treated cells with A. absinthium extract. Changes in "BAX, Caspase 3,9, p53" genes expression were evaluated by Real-time PCR. Quantitative data were analyzed by one-way ANOVA at a significant level of p<0.05.
ResultsThe MTT assay results showed that methanolic extract of A. absinthium, inhibits proliferation of ovarian cancer A2780 cells in a concentration-dependent manner (p<0.001***). Morphological observation with DAPI staining and flow cytometry analysis results showed an increased percentage of apoptotic cells. The real-time PCR results showed an increase in the expression of apoptotic genes "BAX, Caspase 3,9, p53" in treatment groups p <0.01**; p<0.001***.
ConclusionThe results of this study showed that the methanolic extract of A. absinthium inhibits the proliferation of A2780 cancer cells and induces apoptosis in these cells.
Keywords: Ovarian cancer, Apoptosis, Artemisia absinthium -
امروزه مشکل ناباروری در دنیا به صورت یک نگرانی اجتماعی درآمده است و می تواند ضربه روانی شدیدی به زوجین وارد سازد. از مهمترین سلول های تخمدان، سلول های گرانولوزا می باشند که رشد و بلوغ اووسیت ها را تحت تاثیر قرار می دهند. اگزوزوم ها یک کلاس ویژه از وزیکول های خارج سلولی می باشند که می توانند با سیگنال رسانی به سلول ها باعث بروز پاسخ های سلولی شوند. هدف از این پژوهش تجربی بررسی ترشح هورمون های استرادیول و تستوسترون در سلولهای گرانولوزای تحت تیمار با اگزوزوم های مترشحه از سلول های بنیادی مغز استخوان می باشد. در این پژوهش سلول های بنیادی مغز استخوان موش کوچک آزمایشگاهی کشت داده شدند و محیط کشت رویی سلول ها که حاوی اگزوزوم بودند جمع آوری گردید. درادامه با استفاده از میکروسکوپ نیروی اتمی، میکروسکوپ الکترونی نگاره حضور و قطر اگزوزوم ها بررسی شد. در نهایت غلظت هورمون های مترشحه از سلول های گرانولوزا با روش الیزا بررسی شد. نتایج بدست آمده توسط میکروسکوپ نیروی اتمی و نگاره حضور اگزوزوم ها با قطر تقریبی 70 نانومتر را تایید کردند و همچنین تیمار سلول های گرانولوزای تخمدان موش کوچک آزمایشگاهی با اگزوزوم های بدست آمده از سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان موش کوچک آزمایشگاهی موجب افزایش ترشح هورمون های استرادیول و تستوسترون توسط این سلول ها شد. نتایج بدست آمده از این مطالعه موید تاثیر اگزوزوم های مشتق شده از مغز استخوان بر ترشح هورمون ها جنسی و تاثیر بر باروری است.کلید واژگان: سلول های بنیادی، اگزوزوم، سلول گرانولوزا، استرودیول، تستوسترونThe problem of infertility in the world today has become a social concern and can cause severe psychological trauma to couples. One of the most important ovarian cells are granulosa cells that affect the growth and maturation of oocytes. Exosomes are a special class of extracellular vesicles that can trigger cellular responses by signaling to cells. The aim of this experimental study was to evaluate the secretion of estradiol and testosterone in granulosa cells treated with exosomes secreted from bone marrow stem cells. In this study, bone marrow stem cells were cultured and the culture medium of cells containing exosomes was collected. Subsequently, the presence and diameter of exosomes were examined using atomic force microscopy and electron microscopy. Finally, the concentration of hormones secreted from granulosa cells was assessed by ELISA method. The results obtained by atomic force microscopy and electron microscopy confirmed the presence of exosomes with an approximate diameter of 70 nm and also treatment of mice ovarian granulosa cells with exosomes derived from bone marrow mesenchymal stem cells increased the secretion of estradiol and testosterone by these cells. The results of this study confirm the effect of exosomes derived from bone marrow on the secretion of sex hormones and the effect on fertilityKeywords: stem cells, Exosomes, Granulosa cells, estradiol, Testosterone
-
زمینه و هدف
قطع عصب یا کمپرسیون، سبب تخریب جسم سلولی نورون های شاخ قدامی نخاع می شوند. ضایعه عصب محیطی به صورت رتروگراد بر جسم سلولی نورون های آلفا تاثیر و سبب دژنراسیون مرکزی نورون ها در نخاع می شود. گیاه غافث (Agrimonia eupatoria)از خانواده گل سرخیان دارای آثار آنتی اکسیدانی و ضد التهابی است و در بقا و تقسیم نورون ها موثر است. بنابراین این پژوهش با هدف تعیین آثار نوروپروتکتیوی عصاره هیدروالکلی گیاه غافث بر دانسیته نورونی پس از کمپرسیون عصب سیاتیک در رت انجام شده است.
روش بررسیدر این مطالعه تجربی ابتدا 36 راس رت نر نژاد ویستار با وزن 300-250 گرم به صورت تصادفی به شش گروه شش تایی شامل گروه های کنترل، کمپرسیون، تیمار A (کمپرسیون+ عصاره هیدروالکلی با دوز mg/kg 75)، تیمار B (کمپرسیون+ فراکسیون اتیل استات با دوز mg/kg75)، تیمار C (کمپرسیون+ فراکسیون ان بوتانول با دوز mg/kg 75)و تیمار D (کمپرسیون+ فاز آبی با دوز mg/kg75) تقسیم شدند. عصاره هیدروالکلی گیاه غافث با روش سوکسله تهیه شد. درگروه کنترل پس از بیهوش کردن رت ها، عضله در محل عصب سیاتیک بدون آسیب عصب شکافته شد و در گروه کمپرسیون و گروه تیمار عصب سیاتیک پای راست به مدت 30 ثانیه تحت کمپرسیون قرار گرفت. نخستین تزریق عصاره به صورت داخل صفاقی بلافاصله بعد از کمپرسیون عصب و دومین تزریق هفت روز بعد انجام شد. بعد از 28 روز، رت ها تحت روش پرفیوژن قرار گرفته و سپس از نخاع قسمت کمری نمونه برداری شد و نمونه ها پس از طی مراحل پاساژ بافتی و بلوکه کردن به طور سریالی برش هایی تهیه و با آبی تولوییدین و اریتروزین رنگ آمیزی شد. دانسیته نورونی به روش دایسکتور و متد استریولوژی محاسبه و نتایج گروه ها توسط آنالیز (Post Hoc) و Anova با هم مقایسه شدند.
یافته هانتایج مقایسه دانسیته نورونی بین گروه کمپرسیون و گروه های تیمار نشان داد که تمام گروه های تیمار اختلاف معناداری در دانسیته نورونی با گروه کمپرسیون داشته اند (001/0<p). به طوری که بیشترین دانسیته نورونی به ترتیب مربوط به گروه ان بوتانول با میانگین (34 ± 1864) سپس گروه هیدروالکلی با میانگین ( 29 ± 1614) و فاز آبی (24 ± 1597) و در نهایت گروه اتیل استات با میانگین (33 ± 1292) است.
نتیجه گیریبه نظر می رسد که عصاره هیدروالکلی گیاه غافث سبب افزایش دانسیته نورون آلفا شاخ قدامی نخاع پس از کمپرسیون عصب سیاتیک در در موش های صحرایی نر می شود که شاید به دلیل داشتن ترکیب هایی مانند توکوفرول که آثار آنتی اکسیدانی و ضد آپوپتوزی دارد می توانند در ترمیم سیستم عصبی موثر باشند.
کلید واژگان: گیاه غافث (Agrimonia eupatoria)، عصب سیاتیک، آلفا موتونورونDenervation or compression result in the destruction of the cell body of neurons in the anterior horn of the spinal cord. Environmental nerve damage in the form of retrograde affects the cell body of alpha neurons and causes central degeneration of neurons in the spinal cord. Agrimonia eupatoria from the Golsorkhian family has antioxidant and anti-inflammatory effects and is effective in the survival and division of neurons. Therefore, the present study was conducted with the aim of determining the neuroprotective effects of hydroalcoholic extract of the plant unaffected by neural density after compression of the sciatic nerve in rats.
MethodsIn the present experimental study, a total of 36 male Wistar rats weighing 250-300 g were randomly divided into 6 groups of 6: control, compression, treatment A (compression + extract at 75 mg / kg dose), treatment B (Compression + ethyl acetate fraction at 75 mg / kg dose), C treatment (compression + N-butanol fraction at 75 mg / kg dose), and D treatment (compression + blue phase with 75 mg / kg dose). Ghafath plant hydroalcoholic extract was prepared using Souxelle method. In the control group, after anesthetizing the rats, the muscle in the sciatic nerve was split without nerve damage and in the compression group and the sciatic nerve treatment group, the right leg was compressed for 30 seconds. The first intravenous infusion was performed immediately after nerve compression and the second infusion was performed seven days later. After 28 days, the rats were subjected to perfusion and then the lumbar spinal cords were sampled, and the samples were serialized after the tissue passage and blockage steps and stained with blue toluidin and erythrosine. Neurotic densities were calculated using directory method and the results were compared running t-test and ANOVA.
ResultsThe results of comparing neuronal densities between compression and treatment groups showed that all the treatment groups had a significant difference in neuronal density with compression group (P <0.001). Maximum neuronal density was related to n-butanol with a mean of (1864 ± 34), then the group alcoholic ( mean: 1614 ± 29) and the aqueous phase (1597 ± 24) and the Department of ethyl acetate with a mean of 1292 ±33.
ConclusionIt seems that the hydroalcoholic extract of Ghafas plant increases the density of the anterior alpha branch of the spinal cord after compression of the sciatic nerve in male rats, which may be due to compounds such as tocopherol, and with its antioxidant and anti-apoptotic effects can be effective in repairing the nervous system.
Keywords: Agrimonia eupatoria, sciatic nerve, alpha moto neuron -
مقدمه
در پیشرفت سرطان پروستات نقش ژن های سرکوبگر تومور به خوبی شناخته شده است. کاهش یا فقدان بیان این ژن ها باعث گسترش تومور از طریق متاستاز به بافت های دیگر بدن می شود. با توجه به اینکه گیاه گزنه دارای اثرات ضد سرطانی می باشد، پژوهش حاضر با هدف بررسی اثرات عصاره هیدروالکلی ساقه و ریشه گیاه گزنه بر تغییرات بیان ژن های PTEN و MAGI-2 و SMAD-2 در تومور القا شده پروستات موش انجام شده است.
مواد و روش هادر این مطالعه تجربی، عصاره هیدروالکلی گیاه گزنه با دستگاه سوکسله تهیه شد. موش ها بعد از تزریق ماده سرطانی DMBA به ترتیب با دوزهای 75 و 250 میلی گرم برکیلوگرم عصاره ساقه و ریشه گزنه به صورت زیر جلدی طی 28 روز تیمار شدند. همچنین گروه کنترل (شاهد) هیچ ماده ای دریافت نکرد و به گروه شاهد آزمایشگاهی فقط عصاره تزریق شد. تغییرات بیان ژن های مورد نظر توسط Real time PCR مورد بررسی و نتایج، مورد آنالیز آزمون آماری قرار گرفت.
یافته هانتایج نشان داد که بیان ژن PTEN در تیمار با عصاره ریشه دوز 250، نسبت به توموری روز 14 افزایش دارد. بیان ژن MAGI-2 در تیمار با عصاره ریشه دوز 75، در روز 28 نسبت به توموری روز 28، افزایش داشته است. بررسی تغییرات ژن SMAD-2 نشان داد که بیان این ژن در گروه تیمار با عصاره ریشه دوز 250، در روز 21 نسبت به توموری روز 21 افزایش داشته است.
بحث و نتیجه گیریطبق بررسی های انجام شده روی ژن های PTEN، MAGI-2 و SMAD-2 مشخص گردید که غیرفعال شدن این سه ژن بعنوان عامل خطر برای پیشرفت سرطان در نظر گرفته می شود.
کلید واژگان: سرطان پروستات، گیاه گزنه، PTEN، MAGI-2، SMAD-2Yafteh, Volume:23 Issue: 2, 2021, PP 35 -45BackgroundThe role of tumor suppressor genes in the development of prostate cancer is well known. Decrease or lack of expression of these genes causes the tumor to spread through metastasis to other tissues of the body. Since nettle has anti-cancer effects, the aim of this study was to investigate the effects of hydroalcoholic extract of nettle stem and root on the expression changes of PTEN, MAGI-2 and SMAD-2 genes in mouse prostate induced tumor.
Materials and MethodsIn this experimental study, hydroalcoholic extract of nettle was prepared by Soxhlet apparatus. The mice were injected subcutaneously for 28 days after injection of DMBA carcinoma with doses of 75 and 250 mg/kg, respectively. Also, the control group received no drug and the sham group received only the extract. The expression changes of the target genes were analyzed by Real Time PCR and the results were analyzed statistically.
ResultsThe results showed that PTEN gene expression was increased in treatment with 250 root extract compared to day 14 turmeric. Expression of MAGI-2 gene was increased in treatment with root extract of 75 dose on day 28 compared to day 28 tumor. Evaluation of SMAD-2 gene expression showed that expression of this gene in treatment group with 250 root extract increased on day 21 compared to day 21 tumor.
ConclusionAccording to studies on PTEN, MAGI-2 and SMAD-2 have revealed that inactivation of these three genes is considered a risk for cancer progression.
Keywords: Prostate Cancer, Urtica dioica, PTEN, MAGI-2, SMAD-2 -
آسیب های استخوانی یکی از چالش های علم پزشکی محسوب می شود که هر ساله هزینه ی زیادی را در دنیا برای درمان به خود اختصاص می دهد. اگزوزوم ها، نانووزیکول هایی هستند که پروتئین ها و ماده ی ژنتیک به سلول هدف وارد می کنند و به دنبال آن، تکثیر، بقای سلولی و تمایز را در سلول گیرنده القا می نمایند. این ویژگی ها، می تواند اگزوزوم ها را به عامل تمایزی مناسب تبدیل کند. هدف از انجام این مطالعه، بررسی اثر تمایزی اگزوزوم های مشتق شده از مونوسیت ها و ماکروفاژها در داربست های قطره ای کیتوزان آلژینات. داربست های کیتوزانی- آلژیناتی به روش قطره ای به همراه سلول های بنیادی چربی ساخته شد. سپس سلول های مونوسیتی کشت و مایع رویی جمع آوری شد و اگزوزوم ها به روش اولتراسانتریفوژ جمع شدند و توسط روش DLS وSEM شناسایی شدند. نمونه ها تیمار و سپس تستMTT و DAPI و برای بررسی فرآیند تمایز تست آلکالین فسفاتاز و Real-time PCR انجام شد. بررسی یافته های آزمون MTT نشان داد میزان بقای سلول های تمایزیافته با اگزوزوم ها در روزهای 7، 14 و 21 نسبت به کنترل تفاوت معناداری داشت. نتایج DAPI نشان دهنده عدم مرگ سلولی در گروهای تیماری بود و نتایج تست آلکالین فسفاتاز تفاوت معناداری با گروه کنترل نشان داد و همچنین نتایج Real-time PCR افزایش بیان ژن هایBMP 2/6، SMAD4، ژن های تمایزی استیوکلسین (Osc) و استیوپونتین(Opn) نسبت به نمونه کنترل را به همراه داشت. این مطالعه، نشان داد اگزوزوم مشتق از سلول های مونوسیتی و ماکروفاژی، می توانند سبب بقا و تمایز استیوژنیک سلول های مزانشیمی چربی در درابست های کیتوزان آلژینات شوند.
کلید واژگان: اگزوزوم، سلول بنیادی چربی، تمایز سلولی، مونوسیت، داربست کیتوزان، آلژیناتBone injuries are one of the challenges of medical science which costs a lot of money in the world for the treatment every year. Exosomes are nanovesicles which carry the proteins and genetic material into the target cell, which in turn, induces the proliferation, cell survival, and differentiation in the recipient cell. These features make exosomes a proper differentiation factor. This study aimed to investigate the differentiating effect of exosomes derived from the monocytes and macrophages on chitosan alginate drip scaffolds. Chitosan-alginate scaffolds were made by drip method with fat stem cells. Monocytes were cultured, and the supernatant was collected, and the exosomes were collected by the ultracentrifugation. Exosomes were identified by DLS and SEM methods. The samples were treated, and then MTT and DAPI tests were performed. The osteogenic differentiation was examined by alkaline phosphatase and real-time PCR. MTT results showed that the survival rate of differentiated cells with exosomes on days 7, 14, and 21 was increased compared to control group. Moreover, DAPI results showed no cell death in the treatment groups, and the results of the alkaline phosphatase test showed an increase with the control group, and also the results of real-time PCR increased the expression of genes BMP2/6, SMAD4 and differentiation genes Osc and Opn in the treatment group. This study showed that the exosomes derived from the monocytes and macrophages could cause survival and osteogenic differentiation of the fat mesenchymal cells in the chitosan alginate scaffold.
Keywords: Exosome, Fat Stem Cell, cell differentiation, Monocyte, Chitosan, Alginate Scaffold -
پیش زمینه و هدف
تهاجم سرطان ها ازجمله لوسمی به سیستم عصبی مرکزی اتفاق می افتد، سلول های سرطانی ویژگی تکثیر و مقاومت در برابر آپوپتوز دارند. از طرفی اگزوزوم ها با ایجاد ارتباطات سلول به سلول موجب پیشرفت سرطان ها می شوند، در این مطالعه اثر اگزوزوم های سرطان خون بر بیان ژن های مرتبط با آپوپتوز در آستروسیت ها بررسی گردید.
مواد و روش کار:
پس از کشت اولیه سلول های عصبی استخراج شده از بافت مغز، و ارزیابی ایمونوسیتوشیمی توسط آنتی بادی های Nestin، SOX2 و GFAP، از روش تریپسیناژ جهت جداسازی آستروسیت ها استفاده گردید. اگزوزوم ها از محیط کشت رده ی Nalm6 به روش اولتراسانتریفیوژ استخراج گردید و اثرات آن ها بر تکثیر و بیان ژن های Bax و Bcl2 به ترتیب توسط آزمون DAPI و Real time PCR در آستروسیت ها بررسی گردید.
یافته ها:
نتایج ایمونوسیتوشیمی خلوص بالای 90درصد آستروسیت ها را نشان داد. آزمون DAPI پس از گذشت 48 ساعت نشان دهنده ی افزایش معنادار آستروسیت ها تحت تیمار با اگزوزوم (µg/ml50) نسبت به گروه کنترل می باشد (001/0 <p). همچنین میزان بیان ژن های Bax و Bcl2 در آستروسیت های تحت تیمار با اگزوزوم به ترتیب نشان دهنده ی کاهش و افزایش معنادار نسبت به گروه کنترل بوده است (01/0<p و 05/0<p).
بحث و نتیجه گیری:
اگزوزوم های سرطان خون موجب بر هم زدن تعادل در تکثیر آستروسیت ها و مهار آپوپتوز در آن ها با تغییر در بیان ژن های Bax و Bcl2 می گردند، بنابراین مطالعات بیشتر جهت شناسایی مسیرهای دقیق مولکولی دخیل در سرطان پیشنهاد می شود
کلید واژگان: آستروسیت ها، سرطان، اگزوزوم، GFAP، آپوپتوزBackground & AimsUnfortunately, today cancers such as leukemia metastasize to the central nervous system (CNS). Cancer cells proliferate and resist apoptosis features. On the other hand, exosomes promote cancer through cell-to-cell communication. This study investigated the effect of leukemia exosomes on the expression of apoptosis-related genes in astrocytes.
Materials & MethodsAfter the primary culture of brain tissue cells, Immunocytochemical evaluation of cells was performed by specific antibodies Nestin, SOX2, and GFAP. Then, astrocytes were purified from other cells by trypsinage. Exosomes were extracted from supernatant of Nalm6 cell line by ultracentrifugation and their effects on proliferation and expression of Bax and Bcl2 genes were assessed by DAPI and Real-time PCR in astrocytes, respectively.
ResultsResults indicated a purity of over 90% of astrocytes in cell culture medium. DAPI test after 48 hours showed a significant increase in astrocytes treated with exosome (50µg/ml) compared to the control group (p < 001). Also, the expression of Bax and Bcl2 genes in exosome-treated astrocytes showed a significant decrease and increase compared to the control group (p <0.01 and p <0.05), respectively.
ConclusionLeukemia exosomes disrupt the balance of astrocyte proliferation and inhibit apoptosis in them by altering the expression of Bax and Bcl2 genes. Therefore, further studies are recommended to identify exact molecular pathways of cancer.
Keywords: Astrocytes, cancer, exosome, GFAP, apoptosis -
Background
Exosomes are membrane nanovesicles, 30 to 100 nm in diameter, secreted by most cell types. Besides playing many biological roles, especially in cell-cell communication, scientific proof indicated that the pathology of so many human cancers is closely related to many biologic elements in exosomes. They may serve as useful biomarkers for treatment, prognosis, and detection. Cancer cells produce more exosomes, inducing changes in target cells (near or distant from the tumor), such as metastasis and chemotherapy resistance. Therefore, isolation, identification, and analysis of these microvesicles seem essential.
ObjectivesThe current study aimed at collecting and purifying microvesicles secreted from breast cancer cells and confirming the identity of the obtained exosomes using methods assessing size and morphology.
MethodsIn recent research, the MDA-MB-231 cell line was grown under standard conditions. Released exosomes were collected and ultra-centrifuged. Scanning (SEM) and transmission (TEM) electron microscopes, atomic force microscopy (AFM), and dynamic light scattering (DLS) were used to assess exosome size.
ResultsThe obtained data revealed that MDA-MB-231 cells produced exosomes. The nanovesicles were isolated from the culture medium of MDA-MB-231 cells by applying different strategies, including differential centrifugation, filtration, and ultracentrifugation. The exosomes were characterized; they had a size of 30 - 100 nm and spherical shape.
ConclusionsIntercellular communication can be mediated through direct cell-cell contact or transfer of secreted molecules. In the last two decades, a third mechanism for intercellular communication has emerged that involves intercellular transfer of extracellular vesicles (exosomes). Due to their many functions in the body, it is of great importance to purely isolate and recognize exosomes to understand their modes of action as the first step in the advancement of researches. However, more research is required to obtain cost-effective and efficient methods. It was found that MDA-MB-231 cells release exosomes. They are spherical and 30-100 nm in diameter. The use of a combination strategy for the first time was useful in isolating exosomes derived from MDA-MB-231 cells without disturbing their structure. Further studies are required to compile a uniform protocol for exosome isolation in medical research.
Keywords: Exosomes, Sonication, Ultracentrifugation, Dynamic Light Scattering -
Background
Nanoparticles (NPs) are small-sized particles with dimensions of 1 - 100 nm that have various medical and pharmaceutical technology applications.
ObjectivesIn this study, we aimed to develop a quick, green, and eco-friendly procedure for the synthesis of gold NPs (AMGNPs) using the aqueous extract of Achillea millefolium (AM) and evaluate the effects of them on preantral follicle (PF) maturation in vitro compared to commercially provided GNPs (C-GNPs) and the AM extract alone.
MethodsWe assessed PF maturation through the morphological assessment of follicles, diameter changes, and estradiol and progesterone levels in PF. We also evaluated the morphometric indices in the control group and groups treated with the AM extract, green GNPs, and C-GNPs.
ResultsThe results showed that the AM extract had positive effects on the PF development by increasing the production of estradiol. The evaluation of PF treated with C-GNPs one to four days after the treatment showed that the mean diameter of follicles was significantly reduced in the C-GNPs group compared to the control group. Moreover, the mean estradiol level increased, and the mean progesterone level decreased in all the experimental (10, 25, 50, and 100 µg/mL of C-GNPs, green GNPs, and the AM extract) groups compared to the control group (P-value < 0.05). The size and concentration of the NPs were 20 nm and 150 µg/mL, respectively.
ConclusionsThe findings suggest that green GNPs synthesized with the AM extract can minimize the hazardous effects of NPs and have beneficial effects on the development and growth of PF.
Keywords: Progesterone, Extract, Estradiol, Gold Nanoparticles Achillea millefolium, Preantra, l Follicle
- این فهرست شامل مطالبی از ایشان است که در سایت مگیران نمایه شده و توسط نویسنده تایید شدهاست.
- مگیران تنها مقالات مجلات ایرانی عضو خود را نمایه میکند. بدیهی است مقالات منتشر شده نگارنده/پژوهشگر در مجلات خارجی، همایشها و مجلاتی که با مگیران همکاری ندارند در این فهرست نیامدهاست.
- اسامی نویسندگان همکار در صورت عضویت در مگیران و تایید مقالات نمایش داده می شود.